ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中,，誤差分有系統(tǒng)誤差,、偶然誤差、過(guò)失誤差,，而一個(gè)小小的誤差主意能夠影響到實(shí)驗(yàn),，很多人往往因?yàn)橐粋€(gè)小細(xì)節(jié)，一個(gè)誤差沒(méi)能讓實(shí)驗(yàn)成功,。那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮?。砍诵枰?xì)心之外,，還有一些需要重點(diǎn)注意的地方,。今天教您如何才能減少ELISA誤差：
1：檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,，具有一定總結(jié)和分析問(wèn)題的能力,，對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
2：使用校對(duì)過(guò)的微量移液器,，排除自然誤差,。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
3：仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,，嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作,。不同批號(hào)的試劑不可混用,。值得改進(jìn)的地方,，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。
4：洗滌*,，如若洗板不*,，酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗滌液要新鮮,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性,。
5：嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,，反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，酶失活,；反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,，容易洗掉,，都可能造成假陰性。
6：注意試劑盒保存期,，過(guò)保存期的試劑不能使用,。
7：評(píng)估試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否,，對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰,、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn),，判定試劑符合要求后方可使用。
8：嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,，顯色時(shí)間過(guò)短,，加入終止液反應(yīng)終止后,，底物結(jié)合物的量過(guò)少，易出現(xiàn)假陰性,。超過(guò)顯色要求時(shí)間后顯色,，應(yīng)判為假陽(yáng)性，這可能與試劑本身有關(guān),。加顯色劑后立即顯色,，不可報(bào)陽(yáng)性，這可能是本底顯色的結(jié)果,。
9：加樣要準(zhǔn)確,、快速。如果加樣不準(zhǔn)確,，酶生成物的量不能確定,，直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),，所以加樣應(yīng)慎重,。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn)，如果加樣遲緩,，便出現(xiàn)誤差,，而且試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露在外，尤其室溫過(guò)高時(shí),，保存期會(huì)縮短甚至失效,。
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