ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展,。在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中,，誤差分有系統(tǒng)誤差、偶然誤差,、過失誤差,，而一個(gè)小小的誤差主意能夠影響到實(shí)驗(yàn)，很多人往往因?yàn)橐粋€(gè)小細(xì)節(jié),，一個(gè)誤差沒能讓實(shí)驗(yàn)成功,。那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮小,？除了需要細(xì)心之外,，還有一些需要重點(diǎn)注意的地方。今天教您如何才能減少ELISA誤差：
1：檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器,、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力,，對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
2：使用校對過的微量移液器,，排除自然誤差,。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。
3：仔細(xì)閱讀說明書,，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作,。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn),。
4：洗滌*,，如若洗板不*，酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性,。洗滌液要新鮮,，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,，也可能出現(xiàn)假陽性,。
5：嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間，反應(yīng)時(shí)間過長,，酶失活,；反應(yīng)時(shí)間過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,，容易洗掉，都可能造成假陰性,。
6：注意試劑盒保存期,，過保存期的試劑不能使用。
7：評(píng)估試劑的實(shí)用性,，試劑的穩(wěn)定與否,，對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,，應(yīng)進(jìn)行陰,、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可使用,。
8：嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,，顯色時(shí)間過短，加入終止液反應(yīng)終止后,，底物結(jié)合物的量過少,，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)間后顯色,，應(yīng)判為假陽性,，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,，不可報(bào)陽性,，這可能是本底顯色的結(jié)果。
9：加樣要準(zhǔn)確,、快速,。如果加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結(jié)果,。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),，所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),，如果加樣遲緩,，便出現(xiàn)誤差，而且試劑長時(shí)間暴露在外,，尤其室溫過高時(shí),，保存期會(huì)縮短甚至失效。
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