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教您分辨胎牛血清質(zhì)量的優(yōu)劣

閱讀:1479      發(fā)布時(shí)間:2021-11-23
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   市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多,,魚龍混雜,很多科研工作者,,特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人,,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。本人根據(jù)十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗(yàn),,總結(jié)如下:
  一,、外觀
  拿到胎牛血清,先接觸的是血清外觀,,對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說,,外觀的判斷尤為重要
  1、顏色
  根據(jù)血紅蛋白含量的不同,,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,,我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/d,實(shí)際上,, 血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響,,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的游血,。國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,。大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會(huì)有溶血,,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,。 當(dāng)然,,國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛業(yè)消,。進(jìn)口胎牛血消或多或少總有點(diǎn)浴血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿?,紅細(xì)胞容易破裂,。總的來說,。 國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進(jìn)口的血清,,質(zhì)量*好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,,如SERANA   S-FBS-US-015. 差點(diǎn)的呈現(xiàn)出硫紅色或鮮紅色,。當(dāng)然,熱天活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹?由于血紅蛋白的破壞氧化,, 會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,,甚至咖啡色。
  2,、沉癥
  很多血清客戶,, 會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)門血清有沉視, 從面懷疑血請(qǐng)的質(zhì)量問題,,這是沒有根據(jù)的,。血清中的沉定是由纖維蛋白的凝鑒產(chǎn) 對(duì)面清動(dòng)量沒有任何影明。 沉浪的產(chǎn)生原因很多,。 家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān),。國(guó)產(chǎn)的血清,大多來自北方,,由于價(jià)格低廉,,保存環(huán)境都不好,從采血,、冷凍,、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,,就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,,很少有沉淀產(chǎn)生,。
  進(jìn)口的胎牛血清,過濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,,生產(chǎn)后的成品也是清激的,,但隨著時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀,。當(dāng)然,,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,,生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾獨(dú),甚至有大量沉淀,。當(dāng)然,,購(gòu)買回來的血清都是冰凍狀態(tài),,使用時(shí)需要融化,融化過程*好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,,否則沉淀相對(duì)較多,,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙,。
  3,、澄清度
  進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄,、清淡,,而國(guó)產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,,相對(duì)而言更加粘稠,,顏色略深,這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,,但把兩者進(jìn)行對(duì)比,,可容易分辨。
  胎牛血清注意事項(xiàng):
  1. 血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,,每隔一段時(shí)間輕輕搖晃均勻,,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,,血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶,,建議無(wú)菌分裝,再放回冷凍,,避免反復(fù)凍融。4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,,形成絮狀物質(zhì)變差,。
  2. 血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,,平滑肌細(xì)胞時(shí))建議滅活,,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,,如必須滅活請(qǐng)按56℃,,30 min,輕微搖晃原則操作,,滅活溫度高,、時(shí)間長(zhǎng),、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀,。
  3.無(wú)血清培養(yǎng)基:無(wú)血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性,、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),但是,,血清仍然是培養(yǎng)液中最基本的添加物,,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),,待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培養(yǎng)液,。

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