細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)成長(zhǎng)的養(yǎng)分環(huán)境,，是供應(yīng)細(xì)胞養(yǎng)分和促進(jìn)細(xì)胞成長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ),。培育液或培育基的含義簡(jiǎn)直相同，英文都是medium,。當(dāng)它是粉劑時(shí),，傾向性地稱為培育基，而將粉劑配成液體后,，多稱為培育液,。培育液中常常補(bǔ)加血清、抗生素等成分,。
細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法：
澄清度
水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑,。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分只有*溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取，細(xì)胞才能生長(zhǎng)增殖,，因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用,。該項(xiàng)目是通過對(duì)水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查，判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度,。 按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅸ B進(jìn)行,。
pH 值
哺乳類動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)需要合適的酸堿度，pH過高或者過低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。pH值的測(cè)定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差,。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品，用注射用水（水溫20℃-30℃）溶解至1L,，加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,，用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅵ H進(jìn)行,；加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,，按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅵ H進(jìn)行
干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)
細(xì)胞培養(yǎng)基具有吸濕性，在空氣中放置水分會(huì)很快升高,，干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示產(chǎn)品中含濕量,。細(xì)胞培養(yǎng)基是有菌制劑，其豐富的營(yíng)養(yǎng)成分有利于微生物生長(zhǎng),，控制細(xì)胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖,，保持細(xì)胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分。按中華人民共和國(guó)藥典2005 年版二部附錄Ⅷ L 干燥失重測(cè)定法進(jìn)行,。
滲透壓
溶劑通過半透膜由低濃度向高濃度溶液擴(kuò)散的現(xiàn)象稱為滲透,，阻止?jié)B透所需施加的壓力,，稱為滲透壓。細(xì)胞必須生活在等滲環(huán)境中,，動(dòng)物細(xì)胞借助K＋,、Na＋維持滲透平衡。大多數(shù)細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定的耐受性,。但是培養(yǎng)液滲透壓過高容易使細(xì)胞脫水wei縮,，培養(yǎng)液滲透壓過低容易使細(xì)胞膨脹破裂，因此要控制培養(yǎng)基的滲透壓范圍,。按中華人民共和國(guó)藥典2005 年版二部附錄Ⅸ G 滲透壓摩爾濃度測(cè)定法進(jìn)行,。
細(xì)菌內(nèi)毒素
細(xì)菌內(nèi)毒素是許多病原性細(xì)菌所產(chǎn)生的毒素。它的特殊性在于不是細(xì)菌或細(xì)菌的代謝產(chǎn)物,，而是細(xì)菌死亡或解體后才釋放出來的一種具有生物活性的物質(zhì),。培養(yǎng)基細(xì)菌內(nèi)毒素過高，對(duì)生物制品疫苗（如狂犬,、乙肝疫苗）,、基因工程藥品等注射用的藥品都需要檢查細(xì)菌內(nèi)毒素。 因此本項(xiàng)目的檢驗(yàn)符合生物制品質(zhì)量控制要求,。常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)定為＜10 EU/ml,。稱取本品規(guī)定量（見表4-12）的1/100，加入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水10 mL溶解,，吸取該溶液0.1 mL加細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水3.9 mL,，混勻即得試樣。按中華人民共和國(guó)藥典2005 年版二部附錄Ⅺ E 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法中的凝膠法進(jìn)行,。
微生物限度
細(xì)胞培養(yǎng)基不是無菌產(chǎn)品,，其中的微生物在一定條件下會(huì)吸收細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖，導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效,?？刂萍?xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌，是延長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一,。清大天一在參考《中華人民共和國(guó)藥典》2005版二部附錄第100頁(yè)的口服給藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn),，規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細(xì)菌數(shù)每1g不得超過200個(gè),，霉菌數(shù)每1g不得超過50個(gè)。
稱取樣品1 g,，加入無菌純化水10 mL溶解,，混勻即得試樣。按中華人民共和國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅺ J 微生物限度檢查法進(jìn)行,，檢查項(xiàng)目為細(xì)菌數(shù),、霉菌數(shù),。檢查法采用平皿法。
細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)
這是一個(gè)性能特性表述的要求,。細(xì)胞培養(yǎng)基的功能就是培養(yǎng)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞,，因此經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)效果的檢驗(yàn)是產(chǎn)品質(zhì)量?jī)?yōu)劣的直觀表述，這也是很多生物制藥用戶要求的一項(xiàng)指標(biāo),。目前國(guó)內(nèi)尚無細(xì)胞培養(yǎng)和計(jì)數(shù)的法定方法,，可參考《體外培養(yǎng)的原理與技術(shù)》中細(xì)胞計(jì)數(shù)fa論述的內(nèi)容給出。按產(chǎn)品說明書配制培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),，前四天用含10％小牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng),，觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù)，檢查細(xì)胞培養(yǎng)基是否有促生長(zhǎng)的能力,。后三天用不含小牛血清的培養(yǎng)液維持培養(yǎng),，觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù)，檢查細(xì)胞培養(yǎng)基中是否有不利細(xì)胞生長(zhǎng)的毒素,。本試驗(yàn)用細(xì)胞為VERO細(xì)胞,。
細(xì)胞培養(yǎng)液的儲(chǔ)存，細(xì)胞培養(yǎng)液的儲(chǔ)存條件一般為2－8℃,、密閉,、避光保存，但要注意如下幾點(diǎn)：
1） 過濾后的*培養(yǎng)液,，即添加了血清,、谷氨酰胺、抗生素等的培養(yǎng)液要盡快使用,，一般在2－3周內(nèi)使用完,。培養(yǎng)液中的L-谷氨酰胺是不穩(wěn)定的，不同溫度L－谷氨酰胺的降解,。
2） 滅菌后的未加L-谷氨酰胺等添加劑的培養(yǎng)基溶液,，一般可在4℃保存6～9個(gè)月，也可冷凍保存,，用時(shí)解凍
3） 高壓除菌后的培養(yǎng)基應(yīng)置4℃保存,，不能因?yàn)槠淇赡褪芨邷囟雎詢?chǔ)存溫度。
4） 添加某些生長(zhǎng)因子,、激素等添加物,，可能會(huì)改變培養(yǎng)液的儲(chǔ)存條件，比如溫度,、時(shí)間等方面的要求
會(huì)員.png)
6
立即詢價(jià)
您提交后,，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)