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CHANG Amnio羊水培養(yǎng)基使用說明

原代培養(yǎng)：原位法

1. 將羊水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人自己的羊水重懸細胞顆粒,。例如,，將10ml羊水紡絲上清吸至細胞顆粒上方0.5mL，再懸浮。在濃縮的細胞懸液中加入足夠的CHANG Amnio®,，使最終鍍液體積為每個蓋片0.5mL(共4個蓋片)或每個小瓶2mL,。

3.在37°C、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養(yǎng),。

4. 第2天淹水培養(yǎng),，加入2mL CHANG Amnio®,。

5. 4 - 5天后,，檢查培養(yǎng)物的生長情況。一旦觀察到生長情況,，應飼喂培養(yǎng)物,。去除所有培養(yǎng)上清，用2mL新鮮CHANG Amnio®替換培養(yǎng)物,。建議以后每2天喂一次培養(yǎng)液,。

6. 在第5天或之后檢查培養(yǎng)物的生長情況，當觀察到足夠的菌落時采摘,。

7. 結果是在收獲前一天用CHANG Amnio進行培養(yǎng),。

原代培養(yǎng)：培養(yǎng)瓶法

1. 將羊水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人自己的羊水重懸細胞顆粒,。例如,，將10mL羊水紡絲上清吸至細胞顆粒上方1mL，再懸浮,。加入4mL CHANG Amnio,，總體積為每瓶5mL。

3.在37°C,、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養(yǎng),。

4. 第5天檢查生長情況。用新鮮羊膜更換培養(yǎng)基,，如果觀察到足夠的細胞生長就收割,。

5. 檢查培養(yǎng)物的生長情況，此后每天更換培養(yǎng)基,，直到觀察到足夠的菌落并準備收獲,。

6. 結果是在收獲前一天用CHANG Amnio進行培養(yǎng)。

傳代培養(yǎng)

要傳代細胞,，用胰蛋白酶(或pronase,，等等)處理培養(yǎng)物，就像你通常在傳統(tǒng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞那樣,。但是,，應該仔細監(jiān)測蛋白酶的處理。在CHANG羊膜中培養(yǎng)的羊水細胞對蛋白酶的敏感性高于在常規(guī)培養(yǎng)基中培養(yǎng)的羊水細胞?？赡苡斜匾薷哪膮f(xié)議以考慮到這一點,。用于培養(yǎng)的培養(yǎng)基的pH值必須在6.65-7.44之間(即培養(yǎng)基必須是微黃的鮭魚色)。pH值可以很容易地調整,，只需將培養(yǎng)基放在5%-8%的CO2培養(yǎng)箱中,，輕輕松開蓋子約30分鐘。

注:羊膜常形成草酸鈣晶體,。這些晶體的存在尚未被證明會對產品性能造成任何不利影響,。

華雅思創(chuàng)生物集團——Irvine Scientific代理

上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司是一家為生命科學領域內的科學研究、細胞治療和生物制藥相關人員提供優(yōu)質產品和服務的生物高科技公司,，公司主辦的干細胞搜網(w w w.stemcell.so)為中國干細胞領域大資源庫,，網站提供：干細胞治療產品、細胞培養(yǎng)試劑耗材,、臍帶MSC間充質干細胞培養(yǎng)基,、IPS細胞ES胚胎干細胞培養(yǎng)基、DC細胞淋巴細胞無血清培養(yǎng)基,、R&D細胞因子等種類豐富的產品,；涉及StemCell、HY StemCell,、StemRD,、CellGenix、PeproTech,、Corning,、Thermo、Gibco,、 PALL,、LONZA、BD等國際公司品牌和生產廠家,。以“Yes Service"核心服務理念,，緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 越服務 專注生物"打造中華民族全新服務體系，我們與客戶攜手一起探索生命科學奧秘,，解決人類健康問題,，發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài)，推動世界和諧持續(xù)發(fā)展,。