CHANG Amnio羊水培養(yǎng)基使用說明
原代培養(yǎng):原位法
1. 將羊水低速離心以濃縮細(xì)胞。
2. 用少量病人自己的羊水重懸細(xì)胞顆粒,。例如,,將10ml羊水紡絲上清吸至細(xì)胞顆粒上方0.5mL,再懸浮,。在濃縮的細(xì)胞懸液中加入足夠的CHANG Amnio®,,使最終鍍液體積為每個蓋片0.5mL(共4個蓋片)或每個小瓶2mL。
3.在37°C,、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養(yǎng),。
4. 第2天淹水培養(yǎng),加入2mL CHANG Amnio®,。
5. 4 - 5天后,,檢查培養(yǎng)物的生長情況。一旦觀察到生長情況,,應(yīng)飼喂培養(yǎng)物,。去除所有培養(yǎng)上清,用2mL新鮮CHANG Amnio®替換培養(yǎng)物,。建議以后每2天喂一次培養(yǎng)液,。
6. 在第5天或之后檢查培養(yǎng)物的生長情況,當(dāng)觀察到足夠的菌落時采摘,。
7. 結(jié)果是在收獲前一天用CHANG Amnio進(jìn)行培養(yǎng),。
原代培養(yǎng):培養(yǎng)瓶法
1. 將羊水低速離心以濃縮細(xì)胞。
2. 用少量病人自己的羊水重懸細(xì)胞顆粒,。例如,,將10mL羊水紡絲上清吸至細(xì)胞顆粒上方1mL,再懸浮,。加入4mL CHANG Amnio,,總體積為每瓶5mL。
3.在37°C,、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養(yǎng),。
4. 第5天檢查生長情況,。用新鮮羊膜更換培養(yǎng)基,如果觀察到足夠的細(xì)胞生長就收割,。
5. 檢查培養(yǎng)物的生長情況,,此后每天更換培養(yǎng)基,直到觀察到足夠的菌落并準(zhǔn)備收獲,。
6. 結(jié)果是在收獲前一天用CHANG Amnio進(jìn)行培養(yǎng),。
傳代培養(yǎng)
要傳代細(xì)胞,用胰蛋白酶(或pronase,,等等)處理培養(yǎng)物,,就像你通常在傳統(tǒng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞那樣。但是,,應(yīng)該仔細(xì)監(jiān)測蛋白酶的處理,。在CHANG羊膜中培養(yǎng)的羊水細(xì)胞對蛋白酶的敏感性高于在常規(guī)培養(yǎng)基中培養(yǎng)的羊水細(xì)胞??赡苡斜匾薷哪膮f(xié)議以考慮到這一點,。用于培養(yǎng)的培養(yǎng)基的pH值必須在6.65-7.44之間(即培養(yǎng)基必須是微黃的鮭魚色)。pH值可以很容易地調(diào)整,,只需將培養(yǎng)基放在5%-8%的CO2培養(yǎng)箱中,,輕輕松開蓋子約30分鐘。
注:羊膜常形成草酸鈣晶體,。這些晶體的存在尚未被證明會對產(chǎn)品性能造成任何不利影響,。
華雅思創(chuàng)生物集團(tuán)——Irvine Scientific代理
上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司是一家為生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)研究、細(xì)胞治療和生物制藥相關(guān)人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技公司,,公司主辦的干細(xì)胞搜網(wǎng)(w w w.stemcell.so)為中國干細(xì)胞領(lǐng)域大資源庫,,網(wǎng)站提供:干細(xì)胞治療產(chǎn)品、細(xì)胞培養(yǎng)試劑耗材,、臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基,、IPS細(xì)胞ES胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基、DC細(xì)胞淋巴細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,、R&D細(xì)胞因子等種類豐富的產(chǎn)品,;涉及StemCell、HY StemCell,、StemRD,、CellGenix、PeproTech,、Corning,、Thermo、Gibco,、 PALL,、LONZA,、BD等國際公司品牌和生產(chǎn)廠家。以“Yes Service"核心服務(wù)理念,,緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 越服務(wù) 專注生物"打造中華民族全新服務(wù)體系,,我們與客戶攜手一起探索生命科學(xué)奧秘,解決人類健康問題,,發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài),,推動世界和諧持續(xù)發(fā)展。
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