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細(xì)胞培養(yǎng)基中的渾濁,究竟是什么,?

閱讀:2107      發(fā)布時間:2021-8-26
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   細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,。細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),,也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。那么細(xì)胞培養(yǎng)基中的渾濁,,究竟是什么,?
  如果排除了污染,細(xì)胞培養(yǎng)基中的渾濁通常被解釋為金屬,、蛋白和其他培養(yǎng)基組分的沉淀,。沉淀物可能損害細(xì)胞健康,因為它們通過螯合可移除養(yǎng)分和其他需要的組分,,從而改變培養(yǎng)基的組成,。沉淀物也是顯微鏡可見的,可能會干擾依賴成像的實驗分析,。
  產(chǎn)生沉淀的可能原因
  一,、溫度變化
  在細(xì)胞培養(yǎng)中,溫度是引起沉淀的主要因素之一,。當(dāng)遭遇溫度的變化時,,高分子量血漿蛋白會從溶液中析出;熱失活和凍融循環(huán)能促進(jìn)蛋白降解和沉淀,;因為液體或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲存,,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲存液,。
  二,、失水誘導(dǎo)的濃度改變
  如果培養(yǎng)基可能蒸發(fā),培養(yǎng)基組分(包括鹽) 的濃度將會增加,,特別是培養(yǎng)基表面可能容易形成晶體沉淀,。
  三、鈣鹽
  制備無血清培養(yǎng)基時,,組分添加的順序可能導(dǎo)致不可溶分子的形成,。鈣鹽尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應(yīng)產(chǎn)生CaSO4晶體,。高壓滅菌和pH值不穩(wěn)定會加劇這一問題,。
  四、金屬補(bǔ)充物
  銅,、鐵和鋅等金屬離子是細(xì)胞生長所必需的,,是無血清培養(yǎng)基的重要補(bǔ)充物。培養(yǎng)系統(tǒng)中其他血清組分的缺失可能導(dǎo)致這些金屬沉淀,,為細(xì)胞形成有毒的環(huán)境,。在較高pH環(huán)境下(一般>8時),碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子,、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子,、碳酸鹽,、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉淀物,;在氧化條件下,,銅和鋅更易于沉淀。

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