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? 正常情況下，融化后血清的外觀顏色應(yīng)該是,？
血清為動(dòng)物來源,，成分復(fù)雜，不同批次間會(huì)存在一些外觀上的差別。一般情況下,，它們的顏色可能是金黃色,、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間,。

? 血清應(yīng)如何保存,？
未拆封的血清應(yīng)存放于-15至-20℃，避免反復(fù)凍融,。拆封后的血清應(yīng)無菌分裝成一次的用量并存放于-15至-20℃,，在產(chǎn)品質(zhì)量證書標(biāo)識(shí)的效期內(nèi)均可使用。2-8℃溶解后建議盡快使用,。

? 血清的有效期是多久,？
大部分康寧血清效期是5年，針對(duì)每個(gè)批次,，請(qǐng)通過質(zhì)檢文件確定具體效期日期,。


? 血清應(yīng)如何融解？
從冰箱中取出血清,，放于2-8℃融化,，融化過程中不時(shí)旋轉(zhuǎn)（swirling mix）混勻。充分融解后分裝或平衡到室溫后使用

? 為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)絮狀沉淀,？是否需要去除,？如何去除？
多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成,，最常見的原因之一是融化過程中,，脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量,?？梢?00g離心5分鐘，取上清,，然后過濾,。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑，一般的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜,。為避免濾膜阻塞,，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。

? 為什么存放于冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀,？如何避免該現(xiàn)象,？
在2-8°C條件下存放，血清中的多種蛋白或脂蛋白會(huì)形成肉眼可見的沉淀,，如血纖蛋白（fibrin），單體時(shí)處于溶解狀態(tài),，在凍融過程中會(huì)發(fā)生聚集,，形成肉眼可見的沉淀,。但該現(xiàn)象一般不會(huì)影響血清的性能?？梢?00g離心5分鐘,，取上清，然后過濾,。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,，一般的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,，建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清,。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象，建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,，避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長(zhǎng)時(shí)間放置,。

? 血清是否需要做滅活處理？
這取決于您的應(yīng)用,。
滅活過程中,，會(huì)導(dǎo)致血清中某些成分被破壞，如氨基酸,，維生素,，生長(zhǎng)因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清有特殊要求時(shí),，才會(huì)考慮對(duì)血清進(jìn)行滅活處理,。如您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清中的某種組分敏感，需要去除該組分,。最常見的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白,，因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,，肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,，平滑肌收縮等過程，所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過程中需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理,。

? 如何進(jìn)行血清滅活處理,？
血清請(qǐng)先按上述“血清應(yīng)如何融解”中的操作步驟融化和混勻，熱滅活時(shí)請(qǐng)將血清置于56℃水浴30分鐘,。為盡量減少熱滅活對(duì)血清品質(zhì)的影響,，一次滅活的血清體積不宜過大。最好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水（與血清相同溫度）,，滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入56℃水浴, 在裝水的容器中放置溫度計(jì),，加熱過程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清，當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到56℃左右，開始計(jì)時(shí),。56 ℃水浴后,，建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。

? 為什么需要對(duì)血清進(jìn)行g(shù)amma射線輻照,？
gamma 射線輻照的目的是滅活血清中的病毒,，一般情況下，25-40kGy和30-45kGy是常用的輻射劑量,。


? 什么情況下需要無Ca2+/Mg2+離子的PBS,？
取決于您的研究應(yīng)用。除了一些Ca2+/Mg2+會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)以外,，一般在胰酶消化前,，建議用無Ca2+/Mg2+離子的PBS清洗細(xì)胞，因?yàn)镃a2+/Mg2+會(huì)抑制胰酶活性,。若消化后的貼壁細(xì)胞需要繼續(xù)培養(yǎng),，建議消化后用含Ca2+/Mg 2+的PBS清洗，因?yàn)镃a2+/Mg2+有助于細(xì)胞的貼壁過程,。另外,，若需要在緩沖液中長(zhǎng)時(shí)間保存細(xì)胞，也推薦使用含Ca2+/Mg2+的PBS,。

? 康寧無Ca2+/Mg2+離子的PBS和DPBS的區(qū)別是什么,？
取決于您的研究應(yīng)用。除了一些Ca2+/Mg2+會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)以外,，一般在胰酶消化前,，建議用無Ca2+/Mg2+離子的PBS清洗細(xì)胞，因?yàn)镃a2+/Mg2+會(huì)抑制胰酶活性,。若消化后的貼壁細(xì)胞需要繼續(xù)培養(yǎng),，建議消化后用含Ca2+/Mg2+的PBS清洗，因?yàn)镃a2+/Mg2+有助于細(xì)胞的貼壁過程,。另外,，若需要在緩沖液中長(zhǎng)時(shí)間保存細(xì)胞，也推薦使用含Ca2+/Mg2+的PBS,。

? 康寧是否有注射級(jí)別（WFI）的水,？
康寧細(xì)胞培養(yǎng)用水按照USP和/或EP 中對(duì)注射用水（WFI）的無菌要求進(jìn)行質(zhì)控，但康寧的該類產(chǎn)品為科研用產(chǎn)品,，非臨床注射用水,。

? 用于消化的胰酶中加EDTA的原因是什么？
鈣離子會(huì)抑制胰酶活性,，EDTA作為鈣離子螯合劑,，可以去除鈣離子,，有助于胰酶更好發(fā)揮消化細(xì)胞的功能

? 為什么在使用胰酶前要先清洗貼壁細(xì)胞？
目前大部分情況下,，細(xì)胞培養(yǎng)液中都含有一定量血清,。血清中含有抑制胰酶活性的成分，如α1-antitrypsin 和α2-macroglobulin,。建議使用無鈣鎂離子的緩沖液清洗細(xì)胞。