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當(dāng)前位置:廣州信譜徠科學(xué)儀器有限公司>>技術(shù)文章>>InertSustain Phenyl色譜柱操作說明
1.色譜柱信息
InertSustain Phenyl液相色譜柱是在新型高純度球狀硅膠基質(zhì)上鍵合苯基的反相分離模式色譜柱,,具有πT電子相互作用,與C18柱有不同的選擇性,適合用于帶有苯環(huán)的芳香族化合物的分離分析。由于直接鍵合苯基,同一般的烷基苯基柱相比,,對芳香族化合物的電子狀態(tài)的差異有更大的識別度。由于苯基的高密度鍵合,,此款柱子的立體選擇性也更優(yōu)異,,達(dá)
到從未有過的分離性能。InertSustain Phenyl液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成,,到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測,,都是在本公司嚴(yán)格的產(chǎn)品控制下進(jìn)行,因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性,;通過獨(dú)有的裝填技術(shù)填裝的色譜柱柱床密度均一穩(wěn)定,,從而確保色具有高柱效,硅膠粒徑分布均勻,,確保柱壓極低,。
為了能長期保持InertSustain Phenyl液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱,在使用色譜柱之前請仔細(xì)閱讀本說明書,。
2.使用前的檢查與須知事項(xiàng)
●檢查包裝箱的外觀有無異常,。
●打開包裝,檢查色譜柱的填料名稱,、尺寸規(guī)格,、連接形式是否相符。
●色譜柱中封存流動(dòng)相為乙腈/水或者甲醇/水的混合物,,具體比例請參考柱效報(bào)告,。
3.色譜柱填料規(guī)格
4.色譜柱安裝與操作
色譜柱在運(yùn)輸過程中,兩端用堵頭密封,。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí),,首先請確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶,,請采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑對系統(tǒng)進(jìn)行充分過渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中,,并注意流動(dòng)相的方向要與柱上標(biāo)記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標(biāo)準(zhǔn)接頭型式為1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖),,同時(shí)還有耐高壓液相系統(tǒng)的UP型(如下右圖,,目前InertSustain Phenyl暫不提供UP型),,如果需要其他接頭形式請另行咨詢。
色譜柱連接好之后,,請確認(rèn)無漏液現(xiàn)象之后再進(jìn)行后續(xù)操作,。
新的InertSustain Phenyl柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中,在儲存和運(yùn)輸過程中,,硅膠填料可能會干涸,,推薦用純的甲醇或乙腈沖洗10~20倍柱體積對色譜柱進(jìn)行活化,,流速從0.1mL/min緩慢上升到最佳流速,。(如果在活化過程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線不正常時(shí),請及時(shí)聯(lián)系我公司工程師及時(shí)處理,。)然后再用不含緩沖鹽的流動(dòng)相進(jìn)行平衡20倍柱體積,,再用流動(dòng)相平衡,待壓力和基線穩(wěn)定之后,,再進(jìn)樣分析,。
5.樣品與流動(dòng)相
為避免色譜柱堵塞,所有樣品及溶劑,,包括緩沖溶液在內(nèi),,在使用前必須用0.45 μm或者0.22 μm的濾膜過濾。InertSustain Phenyl色譜柱耐純水能力強(qiáng),,可以使用純水或者純的緩沖鹽水溶液作為流動(dòng)相,。
6.色譜柱的保養(yǎng)
●pH InertSustain Phenyl色譜柱可在pH2~7.5范圍內(nèi)使用,為保持色譜柱良好的壽命,,請避免較強(qiáng)的酸或堿性樣品或者流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱,。
●耐壓 常規(guī)色譜柱耐受壓力為20MPa,HP系列耐壓為50MPa,,UHPLC系列耐受80MPa,,但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長時(shí)間在高壓下運(yùn)行會對色譜柱造成難以修復(fù)的損害,,因此系統(tǒng)壓力升高之后,,建議盡快排查系統(tǒng),如果是色譜柱壓力升高,,請及時(shí)采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱,。
●溫度 最高操作溫度為60℃,長時(shí)間在高溫下操作會顯著降低色譜柱壽命,。
●沖洗
1.新柱平衡:新柱是保存在高比例的有機(jī)溶劑中,,建議先采用色譜柱保存流動(dòng)相平衡色譜柱一段時(shí)間,觀察基線和壓力是否正常,,然后再通入流動(dòng)相,。如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對試劑,,直接用流動(dòng)相平衡即可:如果流動(dòng)相使用緩沖鹽,先要用高比例的水相充分過渡20倍柱體積,,然后進(jìn)行流動(dòng)相平衡,。
2.使用完畢后的清洗、保存及再使用時(shí)流動(dòng)相的過渡:
①使用完畢后,,先用高比例的水相進(jìn)行沖洗約20倍柱體積,。
②如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對試劑,上述①完畢后,,用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積,,然后此條件下進(jìn)行保存,再使用時(shí)直接沖流動(dòng)相即可,。
③如果流動(dòng)相中使用緩沖鹽或離子對試劑,,上述①完畢后,用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積,,然后此條件下進(jìn)行保存,,再使用時(shí)請務(wù)必用高比例的水相充分過渡20倍柱體積,再通入流動(dòng)相,。
●儲存 色譜柱長期不用,,建議日常沖洗方法完成之后,再用純乙腈或者甲醇沖洗20倍柱體積,,然后保存在該流動(dòng)相條件下,,之后卸掉色譜柱,兩端用堵頭密封,,并放在溫度變化小的場所,。
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