細胞瞬時轉染

服務簡介：

     細胞轉染的基本原理將外源DNA克隆到載體上后導入細胞，借助宿主細胞表達載體上的目的片段,，從而使目的基因在細胞中發(fā)揮功能,。目前轉染方法有多種，如脂質體轉染法,、磷酸鈣－DNA共沉淀法,、電穿孔轉染法、腺病毒感染等,。
      常規(guī)轉染技術可分為兩大類,，一類是瞬時轉染，另一類是穩(wěn)定轉染,，前者轉染的外源DNA不整合到宿主染色體中,，通常表達只持續(xù)幾天，一般在轉染24-72小時后檢測,。后者轉染的外源DNA將整合到宿主染色體中,，可持續(xù)性表達，一般可用于穩(wěn)定細胞株的構建,。
     本公司使用商用化的lipofectamine2000作為轉染試劑,，所有實驗步驟及試劑按照廠家建議的用量。實驗中使用轉染試劑在常溫條件下同待轉染質粒/RNA在培養(yǎng)基中組裝成復合體,，按照一定的比例將上述裝配產(chǎn)物加入到對數(shù)生長期的細胞中,。待培養(yǎng)一段時間后,，可結合下游實驗檢測項目。

 服務流程：

1. 質粒：
   a. 進行預實驗,，通過轉染含有報告基因的質粒優(yōu)化轉染條件,；
   b. 轉染條件確定后，按照客戶方案進行轉染,；
   c. qPCR或Western Blot檢測轉染效率,。
   （2）SiRNA：
   a. 根據(jù)基因序列，設計并合成siRNA,；
   b. 進行預實驗，通過轉染帶有熒光標記的陰性對照siRNA優(yōu)化轉染條件,；
   c. 通過qPCR和Western Blot驗證siRNA的沉默效率,，篩選siRNA*使用濃度。

客戶提供：
待轉染細胞株及細胞培養(yǎng)的相關信息,，待轉染的質粒信息,，目的蛋白一抗；待轉染的SiRNA,，預測被調(diào)控基因的蛋白的抗體,。
交付內(nèi)容：
瞬時轉染的實驗報告單，含實驗原始實驗圖片,、實驗方法,、siRNA序列等。

收費標準/服務周期/提供結果：
詳談,，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議,。

【本公司合作項目】
慢病毒，腺病毒,，RNAi類,，分子生物實驗，病理實驗,，免疫學實驗,，細胞實驗，動物實驗,，蛋白組學實驗等,，能夠進行藥效學評價、毒理學評價,、細胞藥篩,、動物建模、病理檢測,、蛋白組學,、代謝組學,、高通量測序、ChIP,、CO-IP,、生物信息學分析服務！

詳情請咨詢：

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細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

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