開始細(xì)胞傳代前,，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合),、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液),、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（1萬單位）,、7.5％NaHC03溶液,、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液,。
　　
　　用具：小方瓶(100m1),、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml,、1m1）,、細(xì)胞吹打管（20ml）(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
　　
　　C02孵箱,、超凈臺(tái),、倒置顯微鏡、4℃,、—20℃冰箱
　　
　　操作步驟：鏡檢細(xì)胞,，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰,，具有立體感,，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞,。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),，加入滅活小牛血清10m1，慶大霉素溶液0.3m1,，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml,。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞,；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,，每次10m1，棄去洗液,，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25％胰蛋白酶溶液,，每瓶1m1，細(xì)胞瓶平放,，使消化液*覆蓋細(xì)胞表面,。至細(xì)胞*脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,，再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量,。加塞,，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4天成片,。(由細(xì)胞接種濃度決定),；填寫傳代記錄。