液相色譜儀系統(tǒng)主要由貯液瓶,、泵,、進樣器、柱子,、柱溫箱,、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成,。對于整個系統(tǒng)而言,,柱子、泵和檢測器是核心部件同時也是易出問題的主要部位,。
作為一種高精密儀器,,如果在使用過程中不按照正確操作的話,就容易導致一些問題,。其中常見的就是柱壓問題,、漂移問題、峰型異常問題,。 下面就列出幾個常見故障現(xiàn)象,,并附可能性建議,讓你把故障挨個排除,。
現(xiàn)象1:出現(xiàn)基線不平的現(xiàn)象,,后經過沖洗正常,后又出現(xiàn)柱塞桿漏液,,換了密封圈后正常,,接著測樣品時,泵發(fā)出很大的噪音,,立即停止泵的運行,,對泵進行了潤滑后,噪音消失,,進樣后又發(fā)現(xiàn)出的峰峰高都特別低,,又試了幾次后竟然什么峰也不出了,為什么?
建議:
1,檢查液路是否正常,保證流量,密封性都對的
2,不接柱子進純品看看檢測器有沒有響應,如果沒有就是檢測器出問題了
3,檢查你的樣品是不是正常的
現(xiàn)象2:液相色譜六合進樣器,,近堵住了,,啟動泵進樣閥就開始漏液,有人說是進完樣后沒用甲醇去進樣清洗堵掉了,,我想知道每次走完樣后是不是需要進幾針甲醇去清洗,,而漏液什么原因?
建議:其實要知道六通閥有沒有堵,,你可以在停泵的狀態(tài)下,用有機相來清洗,,如果能夠正常清洗的話,,那應該沒堵,如果溶劑打不進去,,那應該是堵了,,或者你可以看看漏液的地方是不是有螺絲松了。
現(xiàn)象3:使用液相色譜,,將一個樣品連進六針,,峰面積差異很大,忽高忽低,,這是為什么?
建議:
1,、進樣器有的時候會出現(xiàn)氣泡,如果此時連續(xù)進一個樣品就會出現(xiàn)峰面積忽高忽低,,多做幾次purge injector就OK了,。
2、用標準品試一下看是不是樣品的問題,;然后再看看柱壓柱溫,、流速、進樣器,、氘燈有沒有問題,。
3、查看定量環(huán)是否有氣泡
4,、進樣的六通閥,、色譜柱接口、泵至色譜柱接口的管路中是否有泄漏現(xiàn)象
其實,,說到底一般是兩種情況,要么是樣品的原因,,要么是儀器原因,。如果是樣品,建議換一下其他物質試一下,;如果是儀器原因,,可能是進樣器、定量環(huán),、比例閥等等問題,。
附常見故障排除方法,不收藏就太虧了:
1,、操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力很小,,則可能管件連接有漏,注意檢查。當出現(xiàn)錯誤警告(各組件指示燈均為紅色),,一般為漏液,,其中一個感應器中已有溶劑,漏液故障排除后,,擦干,,點擊On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再點擊操作界面中的Instrument/System On即可,。
2,、連接柱子與管線時,應注意擰緊螺絲的力度,,過度用力可導致連接螺絲斷裂,。柱接頭處易發(fā)生漏液,可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊,。不同廠家的管線及色譜柱頭結構有差異,,不要混用,必要時可使用PEEK管及活動接頭,。
3,、操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力非常高,則可能管路已堵,,應先卸下色譜柱,,然后用分段排除法檢查,確定何處堵塞后解決,。若是保護柱或色譜柱堵塞,,可用小流量流動相或以小流量異丙醇沖洗,還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡),,若還是無法通暢,,則需換柱。
4,、運行過程中自動停泵,,可能為壓力超過上限或流動相用完。
5,、樣品瓶中樣品較少,,自動進樣器進樣針無法到達液面,可采用調低進樣針進樣高度的辦法,,注意設置時不要使進樣針碰到瓶底,,微量樣品分析應使用微量樣品瓶。
6,、自動進樣器進樣針未與樣品瓶瓶口對準時,,需重新定位,。
7、泵壓不穩(wěn)或流量不準,,可能為柱塞桿密封圈問題或seal wash墊圈問題,,需更換。
8,、基線產生不規(guī)則噪聲,,可能原因為系統(tǒng)不穩(wěn)定或沒達到化學平衡(使其平衡,若用離子對試劑,,在使用使需要足夠的時間和溶劑體積,,色譜柱才能達到足夠的平衡),流動相被污染(更換流動相,,清洗儲液器,、過濾器,沖洗并重新平衡系統(tǒng)),,色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統(tǒng)的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱),,檢測器不穩(wěn)定。
9,、短期有規(guī)則的噪聲,,可能原因為泵壓不穩(wěn)或泵脈沖,調節(jié)溶劑不適當(如兩種溶劑的互溶性問題),,泵入口管路松或堵塞,,泵太臟,泵柱塞磨損,,檢測器不穩(wěn)定,。
10、長期有規(guī)則噪聲,,可能原因為室溫不穩(wěn)(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當,。
11、基線漂移,,可能原因為系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達到化學平衡,,室溫不穩(wěn)(未使用柱溫箱),流動相污染或分解,,柱污染,檢測池泄漏,,系統(tǒng)泄漏,,固定相流失(另選流動相,另選色譜柱),,測定的波長選擇錯誤(對溶劑有吸收),,樣品組分保留太長(用強度合適的溶劑清洗色譜柱),,檢測器不穩(wěn)定。
12,、每次進樣時的保留時間不重復,,可能原因為系統(tǒng)不穩(wěn)或未達到化學平衡,由于氣泡,、各部件磨損等原因引起的泵壓或泵脈沖輸液不穩(wěn)定,,進樣體積太大或樣品濃度太高平衡被破壞,溶劑配比不合適,,柱被污染,。
13、無峰,,可能原因為檢測器選擇錯誤,,使用錯誤的流動相,樣品降解,。
14,、色譜峰比預計的小,可能原因為進樣體積錯誤,,檢測器燈故障,,進樣問題(瓶號錯、進樣體積不合適,、進樣錯誤,、針頭堵塞)。
15,、峰變寬,,可能原因為進樣體積太大或樣品濃度太高,過濾器,、保護柱入口,、柱入口或連接管路有部分堵塞,檢測器時間常數(shù)設置錯誤,,進樣器問題(如閥漏,、針頭堵塞或損壞),柱或保護柱被污染,,對流動相來說樣品溶劑太強,,使用錯誤的色譜柱,溫度變化,。
16,、出現(xiàn)雙峰/肩峰,可能原因為保護柱或柱入口部分阻塞,,柱或保護柱被污染,,柱性能下降,,保護柱失效,進樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過載),,平衡破壞,。
17、前沿峰,,可能原因為進樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過載),,平衡破壞,對于流動相來說樣品溶劑非極性太強(對于反相柱),,柱或保護柱被污染,,柱性能下降,保護柱失效,。
18,、脫尾峰,可能原因為柱或保護柱被污染,,柱性能下降,,保護柱失效,進樣器問題(如閥漏等),,檢測器時間常數(shù)設置錯誤,。
19、出現(xiàn)鬼峰,,可能原因為流動相被污染,,樣品預處理時產生降解或混入雜質,先前進樣的流出物,,樣品定量管清洗不當,,注射器臟,柱被污染,,進樣裝置被污染,,流動相中含有穩(wěn)定劑/穩(wěn)定劑變化。水膜和油膜的外殼有標示的,。
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