每支移液器的量程通常都用純水和正向移液技術(shù)校準(zhǔn)過(guò)。因此我們推薦使用正向移液技術(shù)移取水性溶液,，如緩沖液，稀釋酸或堿,。當(dāng)移取不同于水的液體時(shí),，由于具有不同的液體特性，其移液量可能偏離所選的量程,。比如 一些生物溶液的移液,，可能會(huì)在移液器或試管中產(chǎn)生氣泡或泡沫,，這將使移液量產(chǎn)生偏差,。在這種情況下,，我們推薦使用反向移液技術(shù)移取高粘度或者容易產(chǎn)生泡沫的液體。反向移液技術(shù)減少了噴濺,，泡沫和氣泡形成,。這種方法尤其適用于移取小體積的液體。

下面先介紹一下正向移液和反向移液技術(shù)的操作,。

1.將按鈕壓至*停點(diǎn),。

2.將吸頭浸入液面下1cm處，緩慢釋放按鈕使其滑回原位,。將吸頭從液體中移出,，接觸容器邊緣除去多余的液體。

3.排液時(shí),，吸頭緊貼容器壁先輕按按鈕至*停點(diǎn),，略作停頓后，將按鈕按至第二停點(diǎn)（這個(gè)操作會(huì)將吸頭內(nèi)的液體*排盡）,，將吸頭從容器中沿容器壁移出,。

4.松開(kāi)按鈕至準(zhǔn)備位置。

1.將按鈕壓至第二停點(diǎn),。

2.將吸頭浸入液面1cm處,，緩慢釋放按鈕使其滑回原位。這將時(shí)液體充滿吸頭,。將吸頭從液體中取出,，接觸容器邊緣去掉多余液體。

3.放液到接收容器時(shí)平穩(wěn)地輕按按鈕至*停點(diǎn),。保持在這個(gè)位置,。一些液體會(huì)殘留在吸頭中不能被放出。

4.殘留在吸頭內(nèi)的液體能夠被吹回原溶劑中或者同吸頭一起丟棄,。

5.松開(kāi)按鈕到準(zhǔn)備位置,。

    選擇合適的移液器對(duì)于微量移液的性也很重要。

    我們使用0.5-10 μl移液器,，配合10ul吸頭,，同時(shí)分別使用正向移液和反向移液，移取1%牛血清白蛋白（BSA,，Sigma A7030）進(jìn)行移液性測(cè)試,。

圖1 表明當(dāng)使用反向移液技術(shù)時(shí)，移液量的變化比使用正向移液技術(shù)處于更狹窄的一個(gè)范圍,。

圖2 表明使用兩種移液方式的不度,。不度是估量移液的重復(fù)性的。反向移液技術(shù)可以使不度相對(duì)于正向移液技術(shù)降低50%。

    這是因?yàn)?，BSA溶液含有易被疏水移液器吸頭壁吸附的疏水成分,。當(dāng)使用正向移液技術(shù)時(shí)，每次移液后少量的液體易殘留在吸頭中,。這種趨勢(shì)會(huì)增加吹出液體體積之間的偏差,，因?yàn)楫?dāng)重復(fù)移液時(shí)吸頭中累積的殘余液體可能增加下一次移液的移液量。而反向移液技術(shù)中有額外的液體被吸入吸頭中,，這些額外的液體作用似一個(gè)蓄水池它使連續(xù)移液的移液量均等,。這個(gè)蓄水池也能阻止空氣在吹出液體的zui后從吸頭口進(jìn)入，這樣可以降低液體起泡的可能性,。這使反向移液技術(shù)在移取小液量液體時(shí)尤其有用,。由此可見(jiàn)，采用反向移液技術(shù),，可較好的提高移取蛋白溶液的度和重復(fù)性,。