產(chǎn)品名稱：小鼠類胰蛋白酶（TPS/BSSP-4）ELISA試劑盒

規(guī)格：96T/48T
價(jià)格：詢價(jià)
貨期：現(xiàn)貨
保存溫度：2-8℃
保質(zhì)期：6個(gè)月
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸
注：本試劑僅供科研,，不得用于臨床

ELISA中常見問題及解決方法
ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高,、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,，如不注意,，有可能導(dǎo)致顯色不全,、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,，以期給同行帶來一些啟發(fā),，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

下面分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,，并給出相應(yīng)的解決辦法

一,、選擇試劑

選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。

二、加樣

可能原因：

 1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣,； 2）手工操作中,，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外,。

解決辦法：

1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后,，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后,，3000rpm離心15分鐘,；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中,，若要貯存,，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2） 加樣后及時(shí)放入孵箱,。 3） 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。 4） 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑,。 5） 標(biāo)本較多時(shí),，請分批操作。

三,、 孵育

可能原因：

1） 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁,，難于清洗*,； 2） 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,，難以清洗*,。

解決辦法：

1） 貼封片或加蓋,； 2） 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。

四,、洗板

可能原因：

1） 采用手工洗板,，孔與孔之間液體交叉。 2） 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),，洗液量不足,，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞,，抽吸不*,；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差,。 3） 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長,。

解決辦法：

1） 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通,，洗完板后在吸水紙（選擇干凈,、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 2） 合理安排,，或多用幾臺洗板機(jī),。

五、顯色

可能原因：

1） 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑,； 2） 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流,。

解決辦法： 1） 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑,，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用,； 2） 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 3） A,、B液應(yīng)避免接觸金屬器械,。

六、終止

可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,，導(dǎo)致假陽性增加,。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

七,、讀板

如讀板時(shí)板底不清潔等,。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸,； 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,，有效提高檢測質(zhì)量。

在實(shí)際操作中,，除了選擇優(yōu)良試劑外,，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測,、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。