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目錄:北京博蕾德科技發(fā)展有限公司>>Hypoxyprobe>>低氧探針>> Hypoxyprobe Pacific Blue Kit 缺氧探針

Hypoxyprobe Pacific Blue Kit 缺氧探針
  • Hypoxyprobe Pacific Blue Kit 缺氧探針
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 Hypoxyprobe
  • 型號(hào)
  • 廠商性質(zhì) 代理商
  • 所在地 北京市
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更新時(shí)間:2024-12-11 20:38:45瀏覽次數(shù):1398評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1Kit
貨號(hào) HP15-100Kit 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 腫瘤缺氧檢測(cè)
Hypoxyprobe Pacific Blue Kit 缺氧探針試劑盒,,核心組分為:缺氧探針(Pimonidazole 或CCI-103F)和缺氧探針的抗體。不同試劑盒中的探針和抗體標(biāo)記不同,。北京博蕾德生物是Hypoxyprobe公司總代理,。

※缺氧探針試劑盒的如何選擇,?
Hypoxyprobe公司缺氧探針試劑盒核心組分為:缺氧探針(Pimonidazole CCI-103F)和缺氧探針的抗體。不同試劑盒中的探針和抗體標(biāo)記不同。北京博蕾德生物是Hypoxyprobe公司總代理?,F(xiàn)貨常備以下幾款缺氧探針試劑盒,。
1) Hypoxyprobe™-1 Kit 此試劑盒適合于免疫熒光和免疫組化和流式檢測(cè),,探針抗體不帶標(biāo)記,需要客戶自己搭配相應(yīng)的二抗,,比如:免疫組化,,需要搭配抗小鼠IgG-HRP 二抗,免疫熒光或流式可搭配FITC-抗小鼠IgG-HRP(或者相應(yīng)的其他標(biāo)記二抗),。此試劑盒應(yīng)用靈活方便,,適合同時(shí)對(duì)組化和熒光檢測(cè)有需求的客戶,也方便客戶搭配不同的抗體標(biāo)記,,滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求,。
2Hypoxyprobe™-1 Plus Kit 此試劑盒適用于免疫熒光和免疫組化和流式檢測(cè)。不需要搭配二抗,。如果做免疫熒光,,只需要用到探針和FITC標(biāo)記的探針抗體,這2個(gè)組分,。如果做免疫組化,,需要用到第3個(gè)組分:兔抗FITC-HRP標(biāo)記的抗體。該試劑盒的優(yōu)點(diǎn)是,,同時(shí)滿足客戶做免疫熒光和免疫組化要求,,不需要客戶自己搭配二抗。
3Hypoxyprobe™-1 Omni Kit 此試劑盒與Hypoxyprobe™-1 Kit 不同的是探針的抗體來源不同,,此試劑盒中的抗體為兔來源,,探針抗體不帶標(biāo)記,需要客戶自己搭配相應(yīng)的二抗,。比如:免疫組化,,需要搭配抗兔IgG-HRP 二抗,免疫熒光或流式可搭配FITC-抗兔IgG-HRP(或者相應(yīng)的其他標(biāo)記二抗),。
4Hypoxyprobe™ Green Kit 此試劑盒適合于免疫熒光和流式檢測(cè),。探針抗體為FITC直接標(biāo)記,可直接用于免疫熒光檢測(cè)(直接免疫熒光)或流式檢測(cè),,不需要搭配二抗,。需要注意研究的組織如有自發(fā)熒光(綠光),比如GFP(一些轉(zhuǎn)基因研究的客戶),,不適合這款試劑盒,。可以選擇其他熒光標(biāo)記的試劑盒,,比如:Hypoxyprobe™ RedAPC(紅光),。
5Hypoxyprobe™ RedAPC此試劑盒適合于免疫熒光和流式檢測(cè),。探針抗體為FITC直接標(biāo)記,可直接用于免疫熒光檢測(cè)(直接免疫熒光)或流式,,操作簡(jiǎn)便,,不需要搭配二抗。
※缺氧探針(派諾硝唑) 探針如何溶解,?
派諾硝唑(Pimonidazole HCl)是弱堿性鹽酸鹽,,水溶性非常好,建議溶解于中性緩沖液(生理鹽水或蒸餾水都可以),。這種水溶性特征有利于在腹腔和靜脈注射時(shí),,控制免疫劑量在0.1-0.5 mL之間。(派諾硝唑溶解度:116mg/ml
※在缺氧標(biāo)記時(shí)派諾硝唑(Pimonidazole HCl)免疫劑量是多少,?
派諾硝唑與缺氧組織結(jié)合程度取決于硝基咪唑的還原率和組織相對(duì)派諾硝唑的結(jié)合率(結(jié)合率與派諾硝唑的濃度和作用時(shí)間成正比),。硝基咪唑的還原率很難預(yù)測(cè),但是組織相對(duì)派諾硝唑的探針的結(jié)合率可以預(yù)測(cè),。以下是研究表明的給出的派諾硝唑的使用濃度:
1)在球狀組織可以檢測(cè)到強(qiáng)信號(hào)的缺氧標(biāo)記染色,,( Exposure = 58mg/kg x 1 hour = 58mg/kg-hour.
2)免疫劑量:0.5g/m2(14mg/kg),在人腫瘤組織和正常細(xì)胞檢測(cè)到強(qiáng)信號(hào)的缺氧標(biāo)記染色,。血漿中的派諾硝唑的半衰期是5小時(shí),。(Exposure = 14 mg/kg x 5 hours = 70 mg/kg-hour.
3)在小鼠腫瘤組織檢測(cè)到強(qiáng)信號(hào)的缺氧標(biāo)記染色,免疫劑量:60mg/kg,血漿中Pimonidazole的半衰期是15min,。(Exposure = 60mg/kg x 0.25 hours = 15 mg/kg - hour.
總之,,對(duì)于大小*的小動(dòng)物,比如:實(shí)驗(yàn)室大鼠或小鼠,,推薦的派諾硝唑的用量是:60mg/kg(kg:動(dòng)物體重),,這個(gè)劑量是經(jīng)濟(jì)有效的劑量。
由于血流效應(yīng),,沒有毒性反應(yīng)或沒有氧濃度變化的的小鼠或大鼠,,劑量控制在30 mg/kg to 400 mg/kg 。對(duì)于移植腫瘤(在小鼠后肢)派諾硝唑探針劑100mg/kg,。
需要注意的是:大于100mg/kg的劑量?jī)H用于移植腫瘤,。
對(duì)于體重不*的大動(dòng)物,具體用量取決于接觸表面積,。對(duì)于人的來說,,推薦的用量是:0.5g/m2 ,而對(duì)于狗0.28g/m2,。
※缺氧探針(Hypoxyprobe-1)是否能進(jìn)入缺氧腦組織或腫瘤組織,。
Hypoxyprobe-1 是水溶性的,其對(duì)應(yīng)游離基/系數(shù)8.5,,因此缺氧探針能夠自由進(jìn)入腦組織以及腦腫瘤組織,。
※派諾硝唑是否是體內(nèi)檢測(cè)缺氧的合適的標(biāo)記物,?
派諾硝唑被認(rèn)為是缺氧檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記物。其優(yōu)點(diǎn)是:
1水溶性好116mg/ml 鹽水),,這樣靜脈或腹腔免疫動(dòng)物時(shí),,可以把免疫量(體積)控制在較小體積。其他的標(biāo)記物,,例如: CCI-103F 探針?biāo)苄詾?/span>10mol 或者更低,,這個(gè)探針常用于花生油,DMSO 配成乳劑用于腹腔注射,,避免血液稀釋。
2穩(wěn)定性好,。固態(tài)探針4℃或常溫性質(zhì)非常穩(wěn)定,,可以保存數(shù)年。高濃度的探針?biāo)芤?,避?/span>4℃保存可以保存數(shù)年,。探針的抗體,可以再4℃保存1年以上,。
3)非危險(xiǎn)化學(xué)品,。對(duì)于小鼠,派諾硝唑探針的半數(shù)致死量(LD50)是:728mg/kg,,因此被認(rèn)為是低毒性的非危險(xiǎn)化學(xué)品,。
4)適用于各種免疫檢測(cè)。派諾硝唑探針檢測(cè)可以用各種檢測(cè)方法檢測(cè),,例如:免疫熒光,、免疫組化,ELISA ,,流式等,。
※派諾硝唑的探針抗體是否可以用于小鼠組織的檢測(cè)?
是的,。對(duì)于福爾馬林固定的石蠟組織,,我們推薦HRP 標(biāo)記的Fab2二抗(例如:HRP - Goat F(ab')2 Anti-Mouse Ig)。這樣會(huì)降低背景,,可以用于不同種屬的動(dòng)物檢測(cè),。
※探針激活和缺氧細(xì)胞結(jié)合原理是什么?
腫瘤乏氧細(xì)胞還原能力強(qiáng),,當(dāng)具有電子親合力的硝基咪唑主動(dòng)擴(kuò)散透過細(xì)胞脂膜,,在細(xì)胞內(nèi)硝基還原酶作用下,硝基被還原,,還原產(chǎn)物與大分子物質(zhì)不可逆結(jié)合,,滯留在組織內(nèi),。而正常含氧細(xì)胞親電子硝基咪唑還原產(chǎn)物立即被氧化,從而用硝基咪唑類化合物在腫瘤內(nèi)的代謝程度來反映腫瘤的乏氧,。
※缺氧探針試劑盒中抗體(IgG1)濃度是多少,?
Hp1-x盒子中抗體濃度:60ug/mlHp2-x, Hp6-x, Hp7-x,HP8-x,HP10-x中抗體濃度為500ug/ml,,其它盒子中,,兔來源的抗血清,沒有純化后的抗體IgG濃度確定確定,。
※探針注射后,,收貨組織的時(shí)間是什么時(shí)候?
在收獲組織過程中,,組織會(huì)逐漸缺氧與探針結(jié)合,,可能會(huì)出現(xiàn)一些假陽性。從時(shí)間上來講,,組織與探針結(jié)合時(shí)間要比收獲組織時(shí)間長(zhǎng)很多,,因此在收貨組織這個(gè)短時(shí)間內(nèi),信號(hào)會(huì)很弱,,因此在此期間探針濃度是有限的,,出現(xiàn)的假陽性是可以忽略的。
對(duì)于人組織的研究,,活組織檢查通常要在探針免疫后16-24小時(shí)后,。探針在人血漿中的半衰期是5小時(shí),因此16-24小時(shí)代表3-5個(gè)半衰期,。也就是說在收貨組織時(shí):只有1/8 1/32的初始探針濃度殘留,,組織固定后,較大程度的減少非特異性結(jié)合,。
在其他的一些的人組織研究中,,活組織檢查通常要在探針免疫1-1.5小時(shí),然后組織立即液氮固定,。這種操作方法,,背景也會(huì)很低。盡管這個(gè)時(shí)候收獲組織:探針濃度在1.5-4小時(shí)內(nèi)相對(duì)較高,,組織固定時(shí)間相對(duì)探針和組織的作用時(shí)間太短,,因此不會(huì)造成高背景。
對(duì)人組織的一些研究一些研究經(jīng)驗(yàn),,對(duì)實(shí)驗(yàn)研究是很有指導(dǎo)意義的,。探針免疫小鼠后,半衰期只有0.25小時(shí)。這種情況下,,1-2小時(shí)收獲組織后,,低溫快速冷凍固定,會(huì)終止非特異性結(jié)合,。
※探針結(jié)合的氧分壓臨界值≤10mgHg是如何確定的,?
A:在固體組織中很難確定硝基咪唑的氧化率。迄今為止,,比較好的實(shí)驗(yàn)方法是來自于Gross et al.’s,,比較氧電極測(cè)量氧分壓和射線自顯跡法測(cè)量放射物標(biāo)記法。甲氧甲基硝基咪唑結(jié)合的顆粒密度10mmHg氧分壓下,,大量增加,。其他的研究Chou et al. 也發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)果。因此10 mm Hg是一個(gè)可信的探針與氧結(jié)合的臨界值,。

已知的關(guān)于缺氧探針在小鼠組織的半衰期,?

小鼠類型

血漿半衰期(min

參考文獻(xiàn)

WH 雄性

22 ± 1

1

WHT雌性

22

2

C3H/He 雄性

28 ± 2; 23.5; 31.3; 24.6

3; 4; 5; 6

※ 動(dòng)物內(nèi)體的氧氮反應(yīng)是否影響派諾硝唑的標(biāo)記效果?
派諾硝唑的Piperidine基團(tuán)很容易氧化成N-氧化物代謝物,。原則上,會(huì)影響派諾硝唑的對(duì)缺氧組織的標(biāo)記效率,。動(dòng)物體內(nèi),,缺氧探針的氧氮反應(yīng)是通過含黃素單氧化酶FMO)激活完成的。FMO在不同動(dòng)物中的分布是不同的,,因此在不同動(dòng)物種屬血漿中的氮氧化物水平是不同的,。有趣的是,派諾硝唑的注射途徑(靜脈或口服)受血漿中氧氮物濃度影響很小,。研究表明用:口服和靜脈注射派諾硝唑探針給狗的腫瘤(用CCI-103F作為缺氧標(biāo)記的對(duì)照探針),。強(qiáng)氧化劑例如:過氧酸是由于超氧化物陰離子與NO反應(yīng),也可以氧化派諾硝唑探針,。盡管這樣,,NO的形成不會(huì)影響派諾硝唑的探針效果。
首先,,通過還原血紅素鐵蛋白復(fù)合物 ,,氧氮反應(yīng)是可逆的以及通過組織還原酶,比如組織黃嘌呤脫氫酶以及還原細(xì)胞色素還原,,派諾硝唑的氧化是有限的,。
第二,通過其他探針的對(duì)照試驗(yàn)說明,,對(duì)缺氧的標(biāo)記程度不受血漿中氧氮化合物影響,。
第三, 氧氮衍生物與派諾硝唑抗體沒有交叉反應(yīng),因此對(duì)派諾硝唑的檢測(cè)沒有任何干擾,。
※ 如果探針標(biāo)記染色結(jié)果與組織缺氧結(jié)果不*怎么辦,?
迄今為止,通過派諾硝唑探針染色結(jié)果與組織缺氧檢測(cè)結(jié)果一般是*的,。
一般來講,,如果對(duì)派諾硝唑的標(biāo)記結(jié)果有疑問。一種方法是,,對(duì)注射派諾硝唑的動(dòng)物吸氧10%,,如果吸氧10%后的動(dòng)物派諾硝唑探針結(jié)合程度顯著提高,有可能缺氧有可能是由于派諾硝唑結(jié)合造成的,。另一種方法是,,用兩種缺氧探針標(biāo)記檢測(cè)干預(yù)前后,組織氧壓的變化,。


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