臨床檢驗常見的標本一般包括血液(指血,,靜脈血),尿,,糞便,,腦脊液,胸腹水,,前列腺液,精液,,陰道分泌物等,,這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求,。 (一) 臨床標本的收集 A,、血液標本 有些生理因素,如吸煙,、進食,、運動、情緒波動,、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,,以條件一致為宜,如無法避免,,應在標本上注明該因素,。 1.外周血 一般選取左手無名指內(nèi)側采血,該部位應無凍瘡,,炎癥,,水腫,破損,。如該部位不符合要求,,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血,。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù),、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量一致,。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,,一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響,。 2.靜脈血 除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜,;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速,;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大,。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,,LDH等的測定,。 B、尿液標本 同血標本一樣,,尿液標本受飲食,、運動、藥物量等因素的影響也較大,,特別是飲食的影響,,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細胞,上皮細胞,,管形)相對集中便于觀察,。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,,但受飲食,、運動,、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結果,,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結果等,。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,,檢出較輕微的病變,。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,,細菌易繁殖,,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質(zhì)的定量,,包括蛋白,,糖,尿17-酮,、17-羥類固醇,,兒茶酚胺,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),,要求無菌,沖洗外陰后留取標本,。所有尿標本的收集都應足量,,zui少12 ml,50 ml,,定時尿須全部收集,,對女性患者應避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標本,。 C,、糞便標本 糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液,、膿血等異常病變成分的糞便,,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材,。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應收集24小時糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立即檢查,,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液,、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學法),,試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應檢查完畢,,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,。 D、腦脊液標本 腦脊液標本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗結果:如細胞變性,,破壞,導致計數(shù)和分類不準,;有些化學物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少,;細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,,*管作細菌培養(yǎng),,第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒,。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全,。 E,、胸腹水標本 與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,,及時送檢,。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細胞學檢查,,一管生化檢查,,一管細菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜,。 F,、前列腺液標本 前列腺液標本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,,須注意防止標本蒸干,,量多時收集在潔凈干燥的試管中,。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣,。 G,、精液標本 精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時送檢,。由于精子生成日間變動較大,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。 H,、陰道分泌物標本 陰道標本采集前24小時應禁止房事、盆浴,、陰道檢查,、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔,。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部,、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本,。 (二) ELISA的標本實驗準備 在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天就進行 檢測的標本,,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的標本,,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應避免反復凍融?br /> 液體類標本: 包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等,。 1. 血清: 室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。 2. 血漿: 應根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。 3. 尿液: 用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實行,。 4. 細胞培養(yǎng)上清: 檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。 5. 培養(yǎng)細胞 檢測細胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。 6. 組織標本 切割標本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用。 |
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