所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

 沙門氏菌（Salmonella）檢測試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用,。

檢測范圍： 96T

2pg/ml-48pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中沙門氏菌（Salmonella）含量,。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中沙門氏菌（Salmonella）水平,。用純化的沙門氏

菌（Salmonella）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入沙門氏菌

（Salmonella）,，再與HRP 標記的沙門氏菌（Salmonella）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗

體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在

酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的沙門氏菌（Salmonella）呈正相關,。

用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中沙門氏菌

（Salmonella）濃度,。

 沙門氏菌（Salmonella）檢測試劑盒試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶

2 酶標試劑6ml×1 瓶8 標準品（96pg/ml） 0.5ml×1 瓶

3 酶標包被板12 孔×8 條9 標準品稀釋液1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份

5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張

6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能

馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀

釋,。

48pg/ml 5 號標準品150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

24pg/ml 4 號標準品150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

12pg/ml 3 號標準品150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

6pg/ml 2 號標準品150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

3pg/ml 1 號標準品150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、

待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，

然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡

量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒后棄去,，如此

重復5 次，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3,。

8. 洗滌：操作同5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。

11. 測定：以空白空調零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止

液后15 分鐘以內進行,。

 沙門氏菌（Salmonella）檢測試劑盒操作程序總結：

計算

以標準物的濃度為橫坐標,，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標

準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD 值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，

即為樣品的實際濃度,。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

用完,，板條應裝入密封袋中保存,。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果,。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間

控制在5 分鐘內,，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。

4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值

大于標準品孔*孔的OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計

算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：,；2-8℃,。

2．有效期：6 個月

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