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白介素6（IL-6)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的顯色和比色 

（1） 顯色 
顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物,。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),，陰性孔可保持無色,，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行,。在定量測定中,，加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,，時間一般不需要嚴(yán)格控制,，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間，及時判斷,。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,，再延長反應(yīng)時間，可使本底值增高,。OPD底物液受光照會自行變色,，顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行，顯色反應(yīng)結(jié)束時加入終止液終止反應(yīng),。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色,。 TMB受光照的影響不大,，可在室溫中置于操作臺上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果,。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,，宜在規(guī)定的適當(dāng)時間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,，約40分鐘顯色達(dá),，隨即逐漸減弱,，至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止,。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間（12-24小時）不褪，是目視判斷的良好終止劑,。此外,，各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時可用特定的波長（450nm）測讀吸光值,。
白介素6（IL-6)ELISA試劑盒ELISA試劑盒 （2） 比色 
比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,，然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗(yàn),，需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,，才可進(jìn)行比色。在加底物液顯色前,，先將軟板邊緣剪凈,，這樣，此板就可*平妥坐入座架中,。比色時應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn),，測讀底物孔（未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔）和空白孔（以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過程的孔），以記錄本次試驗(yàn)的試劑狀況,。其后可用空白孔以蒸餾水校零點(diǎn),，以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度，然后進(jìn)行計算,。比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度（oplical density,，OD），現(xiàn)按規(guī)定用吸光度（absorbence,，A）,，兩者含義相同。通常的表示方法是,，將吸收波長寫于A字母的右下角,，如OPD的吸收波長為492nm，表示方法為"A492nm"或"OD492nm",。
     

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