所有產品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

人γ干擾素（IFN-γ）酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍：                                                            96T
10 ng/L -400 ng/L
 
使用目的：
本試劑盒用于測定科研血清,、血漿及相關液體樣本中γ干擾素（IFN-γ）含量,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人γ干擾素（IFN-γ）水平,。用純化的人γ干擾素
（IFN-γ）抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素（IFN-γ）,，
再與HRP 標記的γ干擾素（IFN-γ）抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗
滌后加底物TMB顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成zui終
的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素（IFN-γ）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定
吸光度（OD 值）,，通過標準曲線計算樣品中人γ干擾素（IFN-γ）濃度。  
試劑盒組成  
1  30倍濃縮洗滌液  20ml×1瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標試劑  6ml×1瓶  8  標準品（800ng/L）  0.5ml×1 瓶
3  酶標包被板  12 孔×8條  9  標準品稀釋液  1.5ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1瓶  10  說明書  1 份
5  顯色劑A 液  6ml×1瓶  11  封板膜  2 張   
6  顯色劑B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 個
人γ干擾素（IFN-γ）酶聯免疫分析試劑盒標本要求  
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人γ干擾素（IFN-γ）酶聯免疫分析試劑盒操作步驟
1.  標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋,。
400 ng/L  5 號標準品  150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
200 ng/L  4 號標準品  150µl的5 號標準品加入150µl標準品稀釋液
100 ng/L  3 號標準品  150µl的4 號標準品加入150µl標準品稀釋液
50 ng/L  2 號標準品  150µl的3 號標準品加入150µl標準品稀釋液
25 ng/L  1 號標準品  150µl的2 號標準品加入150µl標準品稀釋液
 
 
2.  加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同） ,、標準孔,、
待測樣品孔。 在酶標包被板上標準品準確加樣50µl,， 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,，然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡
量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。    
4.  配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5.  洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5次,，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶標試劑50µl,，空白孔除外,。  
7.  溫育：操作同3。
8.  洗滌：操作同5,。
9.  顯色：每孔先加入顯色劑A50µl,，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.  終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應（此時藍色立轉黃色） 。
11.  測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） ,。 測定應在加終止
液后 15分鐘以內進行。
操作程序總結：
 
 
計算
    以標準物的濃度為橫坐標,，OD 值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數,；或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,， 將樣品的OD值代入方程式， 計算出樣品濃度,， 再乘以稀釋倍數,，即為樣品的實際濃度。  
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未
用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值） ，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定,，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5） ,。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.  如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存： ；2-8℃,。
2．有效期：6個月 
   
 
 
 
 

 
 
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