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文章名稱《BMSCs移植對缺血性腦卒中大鼠IL-1β,、TNF-a表達的影響》,，主要講述骨髓間充質(zhì)干細胞（bone marrow mesenchymal stem ceIIs,BMSCs）移植治療大腦中動脈阻塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,，MCAO)模型鼠后,，在不同時間點采用western blot,、ELISA方法檢測IL-1β,、TNF-α的表達變化,，分析BMSCs移植對缺血性腦卒中后炎性因子的影響,，探討B(tài)MSCs移植治療缺血性腦卒中修復受損神經(jīng)功能的可能抗炎機制,。 

文章中使用的大鼠IL-1β聯(lián)酶免疫試劑盒和大鼠TNF-a聯(lián)酶免疫試劑盒均有我司提供！

取幼年雄性SD大鼠骨髓腔細胞,，通過全骨髓培養(yǎng)法和細胞貼壁培養(yǎng)法體外分離,、培養(yǎng)、擴增得到BMSCs,，傳至第4代,，免疫熒光法鑒定，誘導分化為成骨細胞,、脂肪細胞及神經(jīng)干細胞并鑒定,。

取成年雄性SD大鼠，用Longa線栓法制造MCAO模型,。參考Bederson JB評分法測評大鼠神經(jīng)功能缺損,，篩選入組MCAO模型鼠；TTC染色法顯示腦組織梗死范圍，剔除TTC（-）或有出血的大鼠樣本,。 　　

取造模成功的MCAO模型鼠*隨機分為2組：A組/MCAO模型組（n=16）,，即建立MCAO模型后注射1ml生理鹽水；B組/實驗組（n=16）,，即建立MCAO模型后通過尾靜脈注射法移植1ml2×l09/L BMSCs,；A、B組各分為處理后1d,、3d,、7d、14d時間點亞組（n=4）,。

取正常大鼠設C組/空白組（n=4）,，不予任何干預。各亞組行心臟取血,，ELISA方法檢測大鼠血清IL-1β,、TNF-α的表達變化；生理鹽水灌注取腦,，western blot方法檢測大鼠腦組織IL-1β,、TNF-α的表達變化。

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結(jié)果 　　

1.成功培養(yǎng)得到BMSCs,。鏡下細胞形態(tài)：原代BMSCs呈圓形或類圓形,，貼壁數(shù)量少；經(jīng)過純化,、擴增,，貼壁細胞增多，呈長梭形,，集落樣生長,，局部呈漩渦狀；至P7代,，細胞逐漸老化,，以扁平細胞為主。細胞免疫熒光法鑒定：CD54（+）,、CD34（-）,，符合BMSC免疫表型特點。BMSCs誘導為成骨細胞見細小顆粒于培養(yǎng)液,；誘導為脂肪細胞見紅色脂滴于胞漿；誘導為神經(jīng)干細胞見棕色顆粒于胞漿,。 　

2.大鼠神經(jīng)功能評分：造模后1天實驗組評分較模型組無明顯差異（P>0.05）,，3天、7天、14天實驗組較模型組均有下降（P<0.05）,，差異有統(tǒng)計學意義,。 　　

3.大鼠血清IL-1β、TNF-α表達（單位：ng/L）：1天,、3天,、7天、14天各亞組：IL-1β濃度為模型組27.0±0.35,、29.2±0.60,、25.2±0.65、22.8±0.66,，實驗組25.2±0.31,、26.8±0.56、20.8±0.39,、19.2±0.94,，空白組10.9±0.54；TNF-α濃度為模型組231±1.46,、225±4.98,、216±4.16、198±4.61,，實驗組189±2.85,、178±3.17、166±5.27,、157±6.03,，空白組146±6.86；

模型組較空白組均明顯增多（P<0.05）,，實驗組較模型組均減少（P<0.05）,，但較空白組仍增多（P<0.05）。模型組及實驗組與空白組比較：IL-1β表達1天增多,，3天達高峰,，7天下降，14天持續(xù)下降,，但仍高于空白組（P<0.05）,；TNF-α表達1天增多達高峰，3天下降,，7天,、14天緩慢下降，但仍高于空白組（P<0.05）,，差異有統(tǒng)計學意義,。 　

4.大鼠腦組織IL-1β、TNF-α表達（灰度值）：1天、3天,、7天,、14天各亞組：IL-1β為模型組5502±108.9、6267±160.5,、4425±158.1,、3352±187.1，實驗組4217±143.7,、4706±111.8,、3235±150.7、2307±120.7,，空白組1874±70.7,；TNF-α為模型組7801±148.9、6296±170.7,、5399±240.9,、3458±180.2；

實驗組6468±180.9,、5789±119.7,、4647±207.3、2828±152.6,，空白組2215±159.5,；模型組較空白組均增高（P<0.05），實驗組較模型組均降低（P<0.05）較空白組增高（P<0.05）,。模型組及實驗組與空白組比較：IL-1β表達1天增高,，3天達高峰，7天下降,，14天持續(xù)下降但仍高于空白組（P<0.05）,；

TNF-α表達1天增高達高峰，3天下降,，7天,、14天緩慢下降，但仍高于空白組（P<0.05）,，差異有統(tǒng)計學意義,。 　　

結(jié)論 　

1.缺血性腦卒中模型鼠中IL-1β、TNF-α表達增加,，其神經(jīng)損傷可能與炎癥反應有關,。 　

2.骨髓間充質(zhì)干細胞移植可降低MCAO模型鼠IL-1β、TNF-α的表達,，其修復神經(jīng)功能的作用可能與BMSC下調(diào)炎性因子減輕炎癥反應

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