信帆生物新品上市：神經(jīng)肽Y 放免代測服務(wù)供應(yīng),！

神經(jīng)肽Y 放免藥盒操作說明書
NPY RIA KIT
神經(jīng)肽Y(Neuropetide NPY)是一種含有36 個氨基酸殘基的多肽,。廣泛分布于哺乳動物的中
樞神經(jīng)系統(tǒng),。NPY 可收縮血管,，升高血壓,，對心臟表現(xiàn)為負性肌力作用,。zui近有作者證實血小
板有合成NPY 的能力,。NPY 含量與應(yīng)激反應(yīng)程度有關(guān),，當(dāng)出血性休克時，NPY 釋放增加對維
持全身血壓穩(wěn)定和調(diào)節(jié)器官血流量具有重要的代償作用,。研究各種病理狀態(tài)血漿及血小板NPY
含量與釋放的改變及其病理生理意義,，對心腦血管疾病的防治具有廣闊的研究前景。
測定盒組成：
1,、緩沖液一瓶,。
2、分離劑（第二抗體）一瓶,。
3,、NPY 抗體一瓶，用前加ml 緩沖液稀釋,。
4,、NPY 標(biāo)記一瓶，用前加ml 緩沖液稀釋,。
5,、NPY 標(biāo)準(zhǔn)品五瓶：用前每瓶加ml 緩沖液稀釋33、100,、300,、600、1200pg/ml,。
6,、抑肽酶一瓶。
7,、10%EDTA.Na2 一瓶,。
樣品收集：
1、取靜脈血3ml 注入含10%EDTA.Na2 40ul 和抑肽酶10ul（含100U/ml 以上）的試管中,，
混勻4℃,，3000 轉(zhuǎn)/分離心10 分鐘，分離血漿（溶血樣品影響測定結(jié)果）,。如需要可分裝2-3
份保存,，放-20℃可保存2 個月，在-70℃以下可存放半年,。測定前,，使樣本置于室溫或冷水中
復(fù)融，再次4℃,，3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘,，取上清測定。
2,、組織樣品的處理：取出活組織,，吸去血跡，稱重,，放入0.2mol/L 1N HAC 1ml 中,，然后
在100℃水浴中煮沸10 分鐘，勻漿,。4℃,，3000 轉(zhuǎn)/分離心15 分鐘，取上清放-20℃以下保存,，
測定時用PBS 五倍以上稀釋,，以調(diào)節(jié)PH 值。另外,，每種組織的樣品非特異結(jié)合（U0）可能有
差異,，每份標(biāo)本zui單獨做一個U0。取組織的重量視不同組織而異,。
3,、血漿樣品處理：實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)：有少數(shù)患者可能由于使用某些藥物或個體差異，出現(xiàn)血漿
蛋白對抗原抗體反應(yīng)的影響,，測定NPY 值偏低,，甚至為零。為排除樣品中蛋白質(zhì)的干擾,，可采
用簡易酸性乙醇提取法,，
具體步驟如下：
取血漿0.5ml+1ml 酸性無水乙醇（ 100ml 無水乙醇+冰乙酸1.2ml），放振蕩器上振蕩1min,，4℃,，
3500rpm/15min 離心15min，將上清液倒入青霉素瓶,，在45℃水浴鍋上蒸干（可將水浴鍋溫
度調(diào)到80℃左右,，鍋口上放一鋁板，鋁板上溫度約40~45℃,，將青霉素瓶置于鋁板之上）,，大
約需24 小時樣品可以*干燥，干燥后將青霉素瓶加蓋,，封口,，放-20℃保存,。
測定前，每瓶加PH7.4 PBS 0.5ml 溶解,，混勻,，倒入塑料管中，放-20℃ 4h 以上至樣品*
凍結(jié),，然后取出放置4℃*溶解,，取上清200ul 測定用。
注：從4℃取出后,，一定要輕拿輕放,，千萬不要再振蕩混勻，不要在室溫放置過久,，現(xiàn)加現(xiàn)
取,。
測定方法：本實驗采用非平衡法，取聚苯乙烯編號,，按下表操作,。
NPY RIA 操作程序（單位：ul）
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試劑T NSB S0 S1~S5 樣品
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緩沖液—— 300 200 —— ——
標(biāo)準(zhǔn)品—— —— —— 200 ——
樣品—— —— —— —— 200
抗體—— —— 100 100 100
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搖勻，4℃ 48 小時
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125I-NPY 100 100 100 100 100
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搖勻,，4℃ 24 小時
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分離劑—— 500 500 500 500
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混勻,，室溫放置20 分鐘，4℃3500 轉(zhuǎn)/分離心25 分鐘,，去上清,，測定沉淀cpm 值。
結(jié)果計算：
以N/T,、B/T 計算NSB,、S0 結(jié)合百分率，以B/B0 計算標(biāo)準(zhǔn)及待測物結(jié)合百分率,，
在半對數(shù)座標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并查出樣品值或由自動Υ-計數(shù)儀器直接讀出結(jié)果。
注：測兔標(biāo)本時,，應(yīng)改用20%PEG500ul/管分離,。同時向NSB、S0,、S1~S5 管
加Υ球蛋白液100ul/管,；U、U0 管加緩沖液100ul/管,。
本試劑盒主要技術(shù)參數(shù)：
特異性：抗血清與7 種常見的多肽類化合物的交叉反應(yīng)<1%,。
靈敏度：<33pg/ml。可測范圍：33~1200 pg/ml,。
精密度：批內(nèi)CVW<10%,，批間CVb<15% 。
有效期：本藥盒4~8℃,，保存有效期35 天,。
正常參考值：145.1±44.1 pg/ml,。