上海信帆生物代理銷售 MOPS電泳緩沖液,現(xiàn)貨供應(yīng),，歡迎,。

概述編輯

電泳緩沖液是指在進(jìn)行分子電泳時所使用的緩沖溶液，用以穩(wěn)定體系酸堿度,。常見的核酸電泳緩沖液有：TAE,、TBE、TPE和MOPS等,。

作用

緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持合適的pH,。電泳時正極與負(fù)極都會發(fā)生電解反應(yīng)，正極發(fā)生的是氧化反應(yīng)（4OH--4e->2H2O+O2),，負(fù)極發(fā)生的是還原反應(yīng)（4H++4e->2H2),，長時間的電泳將使正極變酸，負(fù)極變堿,。一個好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強(qiáng)的緩沖能力,，使溶液兩極的pH保持基本不變,。

電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導(dǎo)電性，以利于DNA分子的遷移,，例如,，一般電泳緩沖液中應(yīng)含有0.01-0.04mol/L的Na+離子，Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢,；太高時就會造成過大的電流使膠發(fā)熱甚至熔化,。

電泳緩沖液還有一個組分是EDTA，加入濃度為1-2mmol/L,，目的是螯合Mg2+ 等離子,，防止電泳時激活 DNA酶，此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀,。

特點

TAE是使用zui廣泛的緩沖系統(tǒng),。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量（TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實際分子質(zhì)量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,，此外，回收DNA段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳,。TAE的缺點是緩沖容量小,，長時間電泳（如夜）不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換,。

TBE的特點是緩沖能力強(qiáng),，長時間電泳時可選用TBE，并且當(dāng)用于電泳小于1kb的片段時分離效果更好,。TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用,，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用,。

TPE的緩沖能力也較強(qiáng)，但由于磷酸鹽易在乙醇沉淀過程中析出,，所以也不宜在回收DNA段的電泳中使用,。

2配制方法編輯

50×TAE Buffer 配制方法：

1。稱量氨基丁三醇 242g,，Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L燒杯中,；

2。向燒杯中加入約800ml去離子水,，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?/P>

3,。加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解,；

4,。用NaOH調(diào)pH至8.3,，加去離子水定容至1L后，室溫保存,。

使用時稀釋50倍 即1×TAE Buffer

10×TBE Buffer配制方法：

1,。稱量氨基丁三醇 108g，Na2EDTA.2H2O 7.44g,，硼酸55g 于1L燒杯中,；

2。加入約800ml去離子水,，攪拌均勻,；

3。用NaOH調(diào)pH至8.3,，加去離子水定容至1L后,，室溫保存。

使用時稀釋10倍 即1×TBE Buffer

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