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Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù)一步到位
信帆生物提供Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù),老師僅需要提供樣本,,我們提供實驗外包服務(wù),。
預(yù)實驗的內(nèi)容如下:
1)確定一抗的稀釋比例和孵育時間;
2)選擇合適的封閉液及封閉時間,;
3)調(diào)節(jié)合適的上樣量,,使內(nèi)參條帶灰度值趨于一致。
抗體使用有哪些注意事項,?
使用抗體前需仔細(xì)閱讀說明書,了解抗體的保存條件以及不同用途下的推薦稀釋比例,。較高濃度的抗體(>0.5mg/mL)通常性質(zhì)更穩(wěn)定,,受生產(chǎn)工藝和成本控制等因素影響,不同品牌的抗體的濃度也不相同,,所以購買時應(yīng)注意比較,,經(jīng)驗不足的實驗者往往被抗體的體積迷惑,要注意相同質(zhì)量下低濃度的抗體體積反而更大,。
實驗流程:
蛋白提取-制膠-電泳-轉(zhuǎn)膜-封閉-一抗孵育-二抗孵育-化學(xué)發(fā)光-結(jié)果分析;
送樣運輸要求:新鮮組織,,100mg以上,干冰運輸,。細(xì)胞量為5*10^6以上,,收集細(xì)胞沉淀,干冰運輸,。
WB相關(guān)檢測樣本準(zhǔn)備及要求
WB檢測:(檢測某種蛋白的有無及含量差異)
組織樣本:
1,、 組織取樣時洗凈血污,液氮或干冰速凍-80℃保存,,保存時間3個月內(nèi)為宜,,時間過長蛋白可能降解。
2,、標(biāo)本量100mg(黃豆大?。┮陨稀9穷^,、脂肪蛋白含量較少組織需提供200-300mg,。
細(xì)胞樣本:
1.活細(xì)胞匯合度70%-80%,裝滿新鮮培養(yǎng)基,,不透氣培養(yǎng)瓶,,封口膜封口常溫運輸;
2.細(xì)胞沉淀,;
3.細(xì)胞上清,,干冰運輸,。
其他特殊要求:
如客戶提供試劑盒,要求提取特殊蛋白,,需要提前和實驗室溝通,,并且準(zhǔn)備好實驗樣本,保證樣本量充足,。
信帆生物對質(zhì)量的控制涵蓋生產(chǎn),、放行、市場質(zhì)量反饋的全過程,包括原輔料,、包裝材料,、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立,、取樣,、檢驗和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品的精確度、穩(wěn)定性,。
Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù)一步到位
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