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信帆生物專業(yè)提供脂肪酸合成酶(FAS),,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,*,,確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標準,適合客戶要求的產(chǎn)品,。本產(chǎn)品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.
測定意義:
FAS是脂肪酸合成關鍵酶,,催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸,。FAS普遍表達于各種組織細胞中,,在哺乳動物肝、腎,、腦,、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。
測定原理:
FAS催化乙酰CoA,、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+,;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+沒有,;通過測定340nm 光吸收下降速率,,計算FAS活性。
自備儀器和用品:
研缽,、冰,、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,,-20℃保存,。用前1d取出置于4℃充分解凍后混勻。
試劑二:粉劑×1瓶,。臨用前加入440μL試劑四,,充分溶解。
試劑三:粉劑×1瓶,,4℃保存,。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解,。
試劑四:液體×1瓶, 4℃保存,。
試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存,。臨用前加入840μL試劑四,,充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,,加試劑一1 mL充分研磨,16000rpm 4℃離心40min,,取上清液,,待測,。
FAS測定操作:
1. 分光光度計預熱30min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑四置于40℃水浴中預熱30 min以上,。
3. 空白管:在500μL EP管中依次加入20μL蒸餾水,、4μL試劑二、4μL試劑三,、164μL試劑四和8μL試劑五,,迅速混勻后于340nm處測定吸光值,記錄第30s和90s時吸光值,,分別記錄為A1和A2,。△A空=A1-A2。
4. 測定管:在500μL EP管中依次加入20μL上清液,、4μL試劑二,、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五,,迅速混勻后于340nm處測定吸光值,,記錄第30s和90s時吸光值,分別記錄為A1和A2,。△A測=A3-A4,。
注意事項:
上清液蛋白質(zhì)濃度需要另外測定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒,。
信帆生物科技有限公司是一家集生物技術咨詢,、實驗室耗材、科研試劑的銷售,、推廣和售后服務為一體的高科技生物企業(yè),,為各大科研機構、高校,、技術生物企業(yè)提供相關產(chǎn)品,。公司憑借良好的產(chǎn)品質(zhì)量和營銷團隊的奮力開拓,市場空間逐步擴大,,營銷網(wǎng)絡覆蓋全國,,為客戶供應服務,,、用心的服務贏得了眾多企業(yè)的信賴和好評,,在生物設備領域迅速崛起。
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