信帆生物銷售組織及血液酸性磷酸酶

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測定意義：                           
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機(jī)磷酸,，常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi),。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
測定原理：
在酸性環(huán)境中,，ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,，苯酚與4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收,；通過測定510nm吸光度增加速率,，來計(jì)算ACP活性。
自備儀器和用品：
酶標(biāo)儀,、臺式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1酶標(biāo)板和蒸餾水,。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存,。
試劑二：液體×1瓶,，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶,，4℃避光保存,。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存,，變成藍(lán)綠色不能使用,。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支，2μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,，4℃保存,。
粗酶液提取：
稱取約0.1g組織,，加試劑一1mL充分研磨,，4oC,、10000rpm離心10min，取上清液待測,。血液可直接用于測定,，如果濃度高的話，用試劑一稀釋,。
測定：
1.酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,，調(diào)節(jié)波長到510 nm。
2. 試劑二置于37 oC水浴中預(yù)熱30 min以上,。
3. 空白管：在酶標(biāo)板中加入4μL蒸餾水,，40μL試劑二，40μL試劑三,，混勻后37℃保溫15min,；加入試劑四120μL，混勻后于510 nm測定吸光度,，記為A空白管,。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：在酶標(biāo)板中加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二,，40μL試劑三,，混勻后37℃保溫15min；加入試劑四120μL,，混勻后于510 nm測定吸光度,，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5.對照管：在酶標(biāo)板中加入40μL試劑二,，40μL試劑三,，混勻后37℃保溫15min；加入試劑四120μL,，混勻,；后加入4μL上清液，混勻后于510 nm測定吸光度,，記為A對照管,。
6. 測定管：在酶標(biāo)板中加入4μL上清液，40μL試劑二,，40μL試劑三，混勻后37℃保溫15min,；加入試劑四120μL,，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A測定管,。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,，測定管和對照管每個樣均需做,。

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