本文所描述的HPLC,，洗脫液必須具有*的物理和化學(xué)純度,，并且不得含有懸浮機(jī)械性顆粒或任何在保留時(shí)間內(nèi)由流穿色譜柱的溶解物質(zhì),，因?yàn)檫@些溶解物質(zhì)會(huì)產(chǎn)生干擾信號(hào),。溶劑的質(zhì)量往往對(duì)HPLC分析的可靠性起到?jīng)Q定作用。去離子水或蒸餾水仍然含有微量的可產(chǎn)生鬼峰的有機(jī)物質(zhì)[5]溶劑中的污染物會(huì)在固定相上不斷累積,，進(jìn)而導(dǎo)致色譜柱的堵塞,，樣品運(yùn)行期間壓力的上升和漂移可以證明這一點(diǎn)。
HPLC所需的特殊品質(zhì)的水可以從多家生產(chǎn)商處購買,，也可以使用一個(gè)水純化系統(tǒng)在現(xiàn)場(chǎng)直接生產(chǎn),，比如arium® pro VF系統(tǒng)。下面描述的是分離糖混合物的實(shí)驗(yàn),，其中的流動(dòng)相（洗脫）使用的是由arium® pro VF生產(chǎn)的超純水,。
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結(jié)果
1. 各種糖經(jīng) HPLC色譜柱后的分離結(jié)果。黑色曲線：糖混合物 在確定好每一種糖之后,，便開始制備并分離糖混合物（圖5）,。
圖5: 單一注射的糖樣品的分離結(jié)果以及糖混合物用超純水經(jīng)交聯(lián)8 % Na+的Rezex RNM
2. 通過注射磷酸鉀緩沖液和自來水來模擬污染物的效應(yīng)或鹽的影響（圖6）。
注射的自來水電導(dǎo)率為265µS/cm,，磷酸鉀緩沖液的電導(dǎo)率為1700µS/cm,，兩者都顯示了清晰的信號(hào)，因而可以明顯地辨別為污染物,。在本次分析中使用的arium®超純水的電導(dǎo)率為0.055µS/cm,，基本不含干擾性雜質(zhì),，表現(xiàn)為波形平坦,，沒有波峰產(chǎn)生（見圖6中的綠色基線）。
圖6：2µl的10mM磷酸鉀緩沖液,，2µl的自來水以及2µl的arium® pro VF超純水的色譜圖,。
分析運(yùn)行過程中的柱壓恒定地維持在23bar(~ 334psi),。這表明了在色譜柱內(nèi)沒有沉積物累積。開始和結(jié)尾的空白運(yùn)行未顯示出任何改變,；亦即,，在流動(dòng)相中沒有污染物。
對(duì)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行分析,，以確定重現(xiàn)性和檢測(cè)限值,。以棉子糖作為這些分析的例子。保留時(shí)間和峰面積均被記錄并在表4中列出,。
不斷重復(fù)獲得一致的保留時(shí)間說明了具有優(yōu)異的重現(xiàn)性,。棉子糖標(biāo)準(zhǔn)系列顯示了一條濃度高達(dá)0.015mg/ml的線性曲線（圖7）。
圖7：棉子糖和arium® pro VF超純水通過Rezex RNM Carbohydrate Na+ 8%色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)系列（數(shù)值來自表4）,。
根據(jù)量化樣本的峰面積生成一條標(biāo)準(zhǔn)的直線,，對(duì)棉子糖研究是*可行的。
本文的研究結(jié)果顯示由arium® pro VF生產(chǎn)的超純水可以即時(shí)用作上文所列水溶性糖的HPLC分析的流動(dòng)相,，也可用于食品分析,，環(huán)境分析，制藥,、化學(xué)和生物化學(xué)方面的研究,，以及制藥和生物行業(yè)的工藝中質(zhì)量控制測(cè)試。arium® pro VF超純水在HPLC色譜法中作為流動(dòng)相所開展的研究以及所獲得的經(jīng)驗(yàn),，都使其可在不久的將來延伸用于其它分離技術(shù),，比如反相色譜，尺寸排阻色譜或超液相色譜技術(shù)等,。
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