你是否也常常遇到這些超濾實(shí)驗(yàn)的困擾,?
流速太慢:離心機(jī)從晚上9點(diǎn)“肝”到凌晨2點(diǎn)半,,快要崩潰!
濃縮失?。盒那樵愀?,想哭,不是在做實(shí)驗(yàn),,就是在實(shí)驗(yàn)失敗的路上,。
過濾困難:離譜!PBS都濾不下來,,嚴(yán)重耽誤我的實(shí)驗(yàn)進(jìn)度……
濾膜堵塞:誰(shuí)懂啊,,給蛋白換液,堵了兩根超濾管還沒搞完,,一天白干,?
蛋白損失:離心完蛋白漏的干干凈凈,真的栓Q,,難道是我的福報(bào),?
說多了都是淚,好想擁有一支能力強(qiáng),,效果拔群的超濾管,!
別急,讓小賽來為你分憂解難,。切記,,在進(jìn)行樣品濃縮超濾之前,一定要做好正確的選型,,并注意實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范哦,!
如何避開一個(gè)個(gè)超濾實(shí)驗(yàn)中的天坑,小賽準(zhǔn)備了20頁(yè)超長(zhǎng)實(shí)用資料《實(shí)驗(yàn)室過濾解決方案和實(shí)用工具合集》,,涵蓋超濾選型和實(shí)用技巧,,絕對(duì)是你實(shí)驗(yàn)室的得力助手!快來免費(fèi)下載吧,!
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接下來,,讓我們看看超濾管有哪些常見的疑難困惑吧!
Q
如何根據(jù)我的樣品體積,,選擇對(duì)應(yīng)的超濾產(chǎn)品,?
賽多利斯超濾產(chǎn)品家族,,可實(shí)現(xiàn)從0.1mL-5L體積范圍樣品的超濾和透析,且可以使用離心,,加壓,,加壓離心,,以及切向流過濾(TFF)的方式進(jìn)行樣品處理。
Q
不同的超濾方式有什么特點(diǎn)和區(qū)別呢,?
Vivaspin® 超濾管
常用的是離心方式,,過程溫和,方便快速,,可為大多數(shù)樣品溶液提供濃縮過濾,用于純化和濃縮蛋白質(zhì),、核酸,、病毒、大分子和納米顆粒等
Vivaspin® 20和Vivaspin® 100超濾杯
可以在氣體壓力下運(yùn)行,,Vivaspin® 20也可以通過加壓離心運(yùn)行,兩者相結(jié)合的處理時(shí)間通常比離心快30 %到50 %
Vivaflow® 切向流過濾膜包
能夠快速處理大體積樣品,,減少濾膜堵塞,有效回收目標(biāo)分子,。可拓展性強(qiáng),,適用于濃縮,、脫鹽、澄清和分離等多種操作
Q
超濾膜材質(zhì)多種多樣,都適合我的樣品嗎,,我該如何進(jìn)行選擇呢?
小賽推薦4種膜材質(zhì),,分別是聚醚砜(PES),、再生纖維素(RC)、改良的再生纖維素(Hydrosart® RC)和三醋酸纖維素(CTA)供大家選擇,,如圖所示,,快點(diǎn)擊打開看看它們各自的“看家本領(lǐng)”吧,!
Q
我目前做的是XXX樣品,,有對(duì)應(yīng)的超濾管供選擇嗎?
當(dāng)然啦,!賽多利斯的膜材質(zhì)和孔徑十分齊全,在選型正確的前提下,,可以確保任何生物分子的最大回收率哦!
Q
如何選擇最佳的截留分子量(MWCO)呢,?
一般的選擇原則是1/3;如果優(yōu)先考慮截留率,,可選擇更小MWCO,,如1/6,;
如果優(yōu)先考慮流速,可選擇更大MWCO,,如1/2,。注意,不同品牌的截留分子量MWCO略有差異,,不可簡(jiǎn)單照搬哦!
Q
我的樣品是核酸,,如何把單位bp換算成對(duì)應(yīng)的截留分子量KDa呢?
MWCO截留分子量與nm納米 / bp值的換算關(guān)系如圖所示,。
Q
超濾管使用過程中,對(duì)于離心機(jī)的擺放有什么要求,?
超濾過程中,請(qǐng)注意離心力一定不要作用在膜上,,水平轉(zhuǎn)子或角轉(zhuǎn)子的要求也不一樣哦,詳情請(qǐng)看圖示,。
Q
使用不同超濾管時(shí)的離心力如何設(shè)置? 最大處理體積分別是多少?
做實(shí)驗(yàn)時(shí)需要調(diào)整離心力在超濾膜的承受范圍內(nèi),,如果轉(zhuǎn)速太高,可能導(dǎo)致膜破裂,。建議在超濾管中加入樣品時(shí)不要超過最大體積,,以Vivaspin® Turbo 15為例,若使用水平轉(zhuǎn)子,,樣品不得超過15mL,若使用角轉(zhuǎn)子則不超過9mL,。
另外,,建議核酸樣品的離心力比蛋白樣品離心力低一半左右。而如果是線性分子,,在低的離心力條件下可以獲得更好的濃縮效果哦,!
讓我們一起告別超濾實(shí)驗(yàn)的困擾,,迎接更加順利的實(shí)驗(yàn)之旅!
「實(shí)驗(yàn)達(dá)人召集令」來啦,!
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