以高準(zhǔn)確度和精度重復(fù)進(jìn)行揮發(fā)性,、粘性、起泡和油性液體移液相當(dāng)具有挑戰(zhàn)性,。由于這些液體的固有特性,，它們可能會(huì)粘在塑料上或滴漏。這些挑戰(zhàn)只需遵循良好移液實(shí)踐和考慮液體的具體特性即可克服,。
在本實(shí)用指南中,，我們提供了一些建議，幫助您選擇配有兼容移液器吸頭的合適移液器,，以及針對(duì)困難液體的正確移液技術(shù),。
應(yīng)該選擇哪種移液器？
為獲得盡量準(zhǔn)確和可重復(fù)性結(jié)果,，請(qǐng)選擇標(biāo)稱容量（最大容量）接近移液量的移液器,。圖1顯示了使用賽多利斯Picus® 50-1,000μL 移液器和5 - 120μL 移液器進(jìn)行的兩組100μL 乙醇移液操作。對(duì)于Picus® 5 - 120μL 移液器,，當(dāng)操作者,、移液模式（反向移液）和移液技術(shù)（預(yù)潤洗循環(huán)次數(shù)）保持不變時(shí)，可獲得更好的準(zhǔn)確度和再現(xiàn)性,。
圖1.在最大容量時(shí),，移液的準(zhǔn)確度和再現(xiàn)性最好
在反向移液中，吸液量超過目標(biāo)體積,。將柱塞壓到第一個(gè)停止位置后,，排出總目標(biāo)體積，多余的量會(huì)留在吸頭中,。多余的量可返回吸頭中繼續(xù)使用,，也可通過將柱塞壓到第二個(gè)停止位置來廢棄吸頭中的多余液體。在某些情況下,，存在余量對(duì)移液性能有明顯好處,，例如移液揮發(fā)性或粘性液體時(shí)。這些移液技術(shù)之間的差異如圖2所示,。
圖2.基本移液模式圖解 A.正向移液 B.反向移液
電動(dòng)移液器提供額外移液技術(shù),，有助于減少移液的差異和時(shí)間,。其中包括多次分液、多次吸液,、稀釋和滴定等,。
應(yīng)該用哪種移液技術(shù)？
正向移液和反向移液是手動(dòng)移液器可使用的兩種基本移液模式,?；镜牧己貌僮靼▽⒁后w吸入吸頭時(shí)保持移液器直立（0° 角）狀態(tài)，將液體排液到目標(biāo)容器時(shí)將移液器稍微傾斜（30-45° 角）,。
圖3A顯示了移取1,000μL水時(shí)的吸液角度對(duì)準(zhǔn)確度的影響,。隨著吸液角度的增加，實(shí)際移液量幾乎呈直線增加,。圖3B顯示了使用反向移液技術(shù)排液時(shí),，將移液器保持在0°角而非45°角對(duì)準(zhǔn)確度和精度的負(fù)面影響。反向移液1,000μL 水時(shí),，將移液器保持在45°角可獲得更精準(zhǔn)的結(jié)果,。
圖3.吸液和分液角度對(duì)準(zhǔn)確度和精度的影響
如何應(yīng)對(duì)液體從移液器吸頭滴落？
如果液體從移液器吸頭滴落,，應(yīng)首先確保吸頭正確密封在移液器的吸頭圓錐上,。圖4顯示了使用不同制造商的移液器吸頭時(shí)的移液性能差異。
圖4.吸頭和移液器：兼容性很重要
注：不同移液器吸頭與Tacta® 10 μL 移液器結(jié)合用于測(cè)量10 μL,。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)代表用同一移液器吸頭進(jìn)行的10 次測(cè)量,。每種顏色對(duì)應(yīng)一個(gè)移液器吸頭品牌，其中“A” 為賽多利斯移液器吸頭,，“B-E” 為其他制造商吸頭,。一個(gè)品牌內(nèi)的數(shù)據(jù)點(diǎn)之間的分布顯示了同一吸頭盒內(nèi)的各吸頭間的差異。
如果在轉(zhuǎn)移揮發(fā)性液體以外的其他液體時(shí)有大量泄漏的情況,，請(qǐng)檢查移液器吸頭圓錐是否干凈；使用無紡布和合適的清潔劑（如乙醇）將其擦拭干凈,。檢查吸頭圓錐或活塞和套筒之間的密封件有無損壞,。
揮發(fā)性液體
移取揮發(fā)性液體和溶劑（如乙醇、丙酮或乙腈）時(shí),，從移液器吸頭滴落是常見現(xiàn)象,。為避免滴落，請(qǐng)預(yù)潤洗吸頭,，反向移液更有助于改善滴漏情況,。
圖5A顯示了在處理乙腈時(shí)，無預(yù)潤洗的正向移液和適當(dāng)預(yù)潤洗的反向移液之間的差異,。同樣的建議適用于任何容量,，如圖5B 所示,。
圖5.移取揮發(fā)性液體
粘性液體
緩慢的吸液和排液速度至關(guān)重要，因此實(shí)現(xiàn)粘性液體的可靠移液其實(shí)只需適當(dāng)?shù)募夹g(shù)和耐心,。反向移液可提高準(zhǔn)確度,。還需注意的是，請(qǐng)勿將吸頭浸入液體太深,。此外,，吸液時(shí)，移液器吸頭應(yīng)在液體中多浸幾秒鐘,，因?yàn)檫@樣將使液體足以全部吸入到吸頭中,。排液時(shí)，建議將吸頭抵住目標(biāo)容器壁,，使液體附著在目標(biāo)容器上,。寬口吸頭也可用于促進(jìn)液體流動(dòng)，尤其是在溶液中有顆粒的情況下,。
圖6顯示了采用反向移液和Optifit 寬口吸頭移取1,000μL甘油與采用正向移液和標(biāo)準(zhǔn)Optifit 吸頭移取1,000μL 甘油的差異,。
Picus® Nxt 移液器在用戶認(rèn)為有幫助的情況下，可通過正向移液進(jìn)行重復(fù)吹出,。
圖6. 移取粘性液體
油類
與正向移液相比,，反向移液油的排液更準(zhǔn)確，再現(xiàn)性更好,。
在圖7中,，使用賽多利斯Tacta® 10-100μL 手動(dòng)移液器移取丁香酚。
圖7. 油類移液
泡沫液體
含清潔劑或蛋白質(zhì)的液體容易起泡,。處理這些液體時(shí),，必須緩慢移液并使用反向移液技術(shù)。
移液器應(yīng)多久維護(hù)一次,？
經(jīng)常清潔移液器是一種良好操作,。每天擦拭外部和吸頭圓錐可減少交叉污染機(jī)率，并確保正確吸頭密封,。清潔移液器下端內(nèi)部可去除積聚的灰塵,，這有助于活塞密封并保持較低的操作力。清潔還有助于發(fā)現(xiàn)移液器是否因溶劑或蒸汽而老化,，以免影響結(jié)果,。
請(qǐng)記住，無論何時(shí)拆裝下端,，最好在分析天平上檢查移液器性能,，確認(rèn)組裝正確，無任何東西阻礙活塞的完全密封,。
建議移液器的最長維護(hù)間隔時(shí)間為一年,。但應(yīng)根據(jù)移液頻率,、已移液的液體以及移液器的使用年限和型號(hào)等因素來調(diào)整間隔時(shí)間。校準(zhǔn)應(yīng)至少每年進(jìn)行一次,，或根據(jù)使用頻率每3 - 6 個(gè)月進(jìn)行一次,。更換移液器零件（如吸頭圓錐或活塞）后，還應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn),；現(xiàn)場(chǎng)高壓滅菌后,，只需進(jìn)行性能檢查。
總結(jié)
移液技術(shù)在獲得理想結(jié)果方面具有核心作用,。移取具有挑戰(zhàn)性液體時(shí),，學(xué)會(huì)利用反向移液非常有用。良好實(shí)踐是始終首先考慮液體,，并相應(yīng)采取移液操作,。
表1總結(jié)了各種液體的建議移液技術(shù)。
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