上期我們?yōu)槟榻B了如何根據(jù)您的實驗需求選擇合適的超濾管,，本期我們總結(jié)了超濾管使用過程中經(jīng)常遇到的問題，分析問題產(chǎn)生的原因并給您一個的解決方案,。
超濾膜一次使用就碎了,？可能和我們的離心機有關(guān)系
超濾管如果離心轉(zhuǎn)速過高，可能會導(dǎo)致膜甚至管子的破裂,。離心機的轉(zhuǎn)速與離心機的半徑以及離心力都有關(guān)系,，不同半徑的離心機，相同轉(zhuǎn)速出來的離心力也不一樣,，可以公式換算,！說明書中明確指出使用超濾管的大轉(zhuǎn)速和離心力，做實驗時要根據(jù)不同品牌的超濾管調(diào)整到離心力的承受范圍內(nèi),。另外,，超濾管在離心機中的擺放也是有講究的，使用角轉(zhuǎn)子時,，超濾管放置方式要求印有刻度一側(cè)朝上|朝外(這樣雙面膜才能發(fā)揮切向流的作用),，使用水平轉(zhuǎn)子沒有特殊要求；要不也會發(fā)生破裂哦～在濃縮管中加入樣品,，不得超過大體積,。（以Turbo15 為例,，若使用水平轉(zhuǎn)子不得超過15ml 樣品,，若角轉(zhuǎn)子則9ml）
雙面垂直膜--窗口朝上
單面垂直膜--刻度面朝上
另外，還要注意的是，離心15ml或是50ml外管的超濾管使用尖底的轉(zhuǎn)子，因為超濾管的底部是尖底的,。如果使用圓底的轉(zhuǎn)子,，有可能無法把樣品管放滿，或是會增加外管底部磨損破損的幾率,。
脫鹽濃縮,，一個超濾管就可以搞定
濃縮用超濾管,，脫鹽用透析袋或脫鹽柱,，這是很多實驗室一直沿用的實驗操作,。其實呢，超濾管做“脫鹽+濃縮”,，也是很多蛋白操作高手的小訣竅,。而如果你的樣品量有幾十毫升甚至幾升，選擇賽多利斯的超濾膜包會在一小時之內(nèi)完成自動換液,，非常的方便哦,！
另外，賽多利斯的超濾管也有針對于換液的特殊設(shè)計：
a.加2ml樣品到濃縮管
b.清空濾過管
c.插入滲濾小管到濃縮管,，加入10ml去離子水或是緩沖液,。旋上蓋子
d.重復(fù)濃縮步驟，會有98%的無機鹽濾過
e.去除滲濾小管,，回收濃縮后的樣品
我用濃縮后的蛋白做下游分析時發(fā)現(xiàn)有干擾,，可能原因
超過濾薄膜含有微量甘油和NaN3。 如果此材料干擾分析,，可用緩沖液或去離子水預(yù)清洗,。如果干擾仍然存在，用0.1 N NaOH清洗,，然后用緩沖液或去離子水再次清洗后甩干,。同樣需要強調(diào)的是，如果用NaOH處理,，可能會對RC膜有一定影響,，所以，盡量選擇PES膜并且避免過夜浸泡,。
Vivaspin超濾管系列具有的尖角死體積樣品安全保護技術(shù),，防意外甩干，給珍貴的樣品更多一道保障,！另外,，根據(jù)蛋白的分子量和體積的不同，Vivaspin系列有多達24種不同選擇,。樣品處理體積包括從100μl到20ml,，截留分子量也涵蓋了2KDa到0.2um。
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