Mouse Endocan ELISA Kit

Mouse Endocan ELISA Kit標(biāo)本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測種類。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。

1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取，無需組織裂解試劑,，實驗過程無需調(diào)pH值,、離心；
2.快速分型擴增：45分鐘快速高效擴增,；
3.擴增試劑：分熱啟動型和非熱啟動型兩種,，含有染料，擴增后可直接電泳,；
4.減少繁瑣步驟,，降低污染風(fēng)險；
5.高通量操作：可在PCR儀上批量處理樣本,；
6.擴增產(chǎn)物末端加A,，且可進行下游酶切、測序等,；
7.節(jié)約成本,，提取+擴增，合計低于6元,。

屬進口分裝試劑盒類產(chǎn)品,。公司還有血清、細(xì)胞,、抗體,、細(xì)胞因子、實驗試劑,、移液器,、實驗耗材、實驗儀器及實驗技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品,，歡迎新老客戶,。

水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗嗎？

導(dǎo)向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進入“我國水貂病毒性腸炎病原分離,、鑒定,、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”

小鼠尾靜脈采血，如何從全血中制備ELISA用血清,，有什么原則嗎,？

放4℃過夜,，然后4℃離心，取上清即可用于ELISA,。

細(xì)胞株

　　Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,？還是冷凍好？

　　要冷藏??！因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時，其溶液的pH值會發(fā)生改變,，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。

　　Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用，及使用方法,。

　　幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時,，細(xì)胞生長不良而死亡,。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,，應(yīng)置-20 ?C冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,，應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）,。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色,，-24?C保存

　　Q3.細(xì)胞計數(shù)及存活測試
1、原理：
(1)計算細(xì)胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù),。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,，每個chamber中細(xì)刻9個1mm2大正方形，其中4個角落之正方形再細(xì)刻16個小格,，深度均為0.1mm。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時,，計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104,，即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會滲入死細(xì)胞中而呈色,，而活細(xì)胞因細(xì)胞膜完整，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料,，如果細(xì)胞不易吸收trypan blue，則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細(xì)胞活率：活細(xì)胞數(shù)/(活細(xì)胞數(shù)+死細(xì)胞數(shù))×100%,。計數(shù)應(yīng)在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成，隨時間延長,，部分活細(xì)胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質(zhì)有很強的親和力,，用不含血清的稀釋液，可以使染色計數(shù)更為準(zhǔn)確,。

上一篇： M-CSFR試劑盒