MK ELISA

MK ELISA標本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      組織標本：
切割標本后，稱取重量,。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),。用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,，如有必要，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。

1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,，無需組織裂解試劑，實驗過程無需調(diào)pH值,、離心,；
2.快速分型擴增：45分鐘快速高效擴增；
3.擴增試劑：分熱啟動型和非熱啟動型兩種,，含有染料,，擴增后可直接電泳；
4.減少繁瑣步驟,，降低污染風險；
5.高通量操作：可在PCR儀上批量處理樣本,；
6.擴增產(chǎn)物末端加A,，且可進行下游酶切、測序等,；
7.節(jié)約成本，提取+擴增,，合計低于6元,。

屬進口分裝試劑盒類產(chǎn)品,。公司還有血清、細胞,、抗體,、細胞因子、實驗試劑,、移液器、實驗耗材,、實驗儀器及實驗技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品,，歡迎新老客戶。

水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗嗎,？

導向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進入“我國水貂病毒性腸炎病原分離、鑒定,、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”

小鼠尾靜脈采血,，如何從全血中制備ELISA用血清，有什么原則嗎,？

放4℃過夜，然后4℃離心,，取上清即可用于ELISA,。

細胞株

　　Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好,？

　　要冷藏！,！因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。

　　Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用，及使用方法,。

　　幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求，細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),，在缺少谷氨酰胺時,，細胞生長不良而死亡。所以,，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,，應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,，應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺?；A(chǔ)醫(yī)學細胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）,。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色，-24?C保存

　　Q3.細胞計數(shù)及存活測試
1,、原理：
(1)計算細胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù),。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers，每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,，其中4個角落之正方形再細刻16個小格,，深度均為0.1mm,。當chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時,，計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細胞數(shù)目,，乘以稀釋倍數(shù)，再乘以104,，即為每ml中之細胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會滲入死細胞中而呈色,，而活細胞因細胞膜完整，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料，如果細胞不易吸收trypan blue,，則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細胞活率：活細胞數(shù)/(活細胞數(shù)+死細胞數(shù))×100%,。計數(shù)應(yīng)在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成，隨時間延長,，部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質(zhì)有很強的親和力,，用不含血清的稀釋液，可以使染色計數(shù)更為準確,。

上一篇： M-CSFR試劑盒