MMP-1試劑盒
MMP-1試劑盒標本必須為液體,,不含沉淀。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清,。如有沉淀形成,,應再次離心,。
◇ 血漿:
應根據試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 尿液,、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,,應再次離心。
◇ 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 組織標本:
切割標本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
1.快速提取:15分鐘快速基因組DNA提取,,無需組織裂解試劑,,實驗過程無需調pH值,、離心,;
2.快速分型擴增:45分鐘快速高效擴增;
3.擴增試劑:分熱啟動型和非熱啟動型兩種,,含有染料,,擴增后可直接電泳;
4.減少繁瑣步驟,,降低污染風險;
5.高通量操作:可在PCR儀上批量處理樣本,;
6.擴增產物末端加A,,且可進行下游酶切,、測序等;
7.節(jié)約成本,,提取+擴增,,合計低于6元。
屬進口分裝試劑盒類產品,。公司還有血清,、細胞、抗體,、細胞因子,、實驗試劑、移液器,、實驗耗材、實驗儀器及實驗技術服務等等產品,,歡迎新老客戶,。
水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗嗎?
導向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進入“我國水貂病毒性腸炎病原分離,、鑒定、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”
小鼠尾靜脈采血,,如何從全血中制備ELISA用血清,,有什么原則嗎,?
放4℃過夜,然后4℃離心,,取上清即可用于ELISA,。
細胞株
Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好,?
要冷藏!,!因為液體培養(yǎng)基經冷凍后再經溶化時,,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,,某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。
Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使用方法,。
幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,,在缺少谷氨酰胺時,,細胞生長不良而死亡,。所以,,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應置-20 ?C冰凍保存,,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,,應重新加入原來量的谷氨酰胺?;A醫(yī)學細胞中心在其服務項目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色,-24?C保存
Q3.細胞計數及存活測試
1,、原理:
(1)計算細胞數目可用血球計數盤或是Coultercounter粒子計數器自動計數,。
(2)血球計數盤一般有二個chambers,每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,,其中4個角落之正方形再細刻16個小格,,深度均為0.1mm。當chamber上方蓋上蓋玻片后,,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時,計數每個大正方形內之細胞數目,,乘以稀釋倍數,再乘以104,,即為每ml中之細胞數目,。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,利用染料會滲入死細胞中而呈色,,而活細胞因細胞膜完整,染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料,,如果細胞不易吸收trypan blue,,則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細胞活率:活細胞數/(活細胞數+死細胞數)×100%。計數應在臺盼蘭染色后數分鐘內完成,,隨時間延長,,部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質有很強的親和力,用不含血清的稀釋液,,可以使染色計數更為準確。
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