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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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12221ESHieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit fo
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 12221ES 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：185更新時間：2025-02-07 13:51:26
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina V2是針對Illumina®測序平臺專業(yè)開發(fā)設(shè)計的新一代DNA甲基化建庫試劑盒，在前一代建庫試劑盒的基礎(chǔ)上,，改善了接頭連接效率,，并采用了更加新型的高保真酶，顯著提高擴增均一性和保真性。適用于各種經(jīng)Bisulfite處理的樣本類型,，包括gDNA,、FFPE DNA、cell free DNA (cfDNA),、ChIP DNA等,，可以滿足Bisulfite處理后的10 pg~250 ng DNA樣本建庫。該試劑盒可兼容短至40 bp的DNA樣本,。本產(chǎn)品不僅更加經(jīng)濟,，同時也提供了簡便快速的建庫流程，一般在2小時左右可以完成正常建庫,。
運輸與保存方法
冰袋運輸,。所有組分-20 °C保存，有效期1年,。
注意事項
一,、關(guān)于操作
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
2. 請于使用前將試劑盒各組分置于室溫解凍,。解凍后上下顛倒數(shù)次充分混勻，短暫離心后置于冰上待用,。
3. 配制各步驟反應液時推薦使用移液器吹打混勻或輕輕振蕩,，劇烈振蕩可能會造成文庫產(chǎn)出下降。
4. 為避免樣品交叉污染,，推薦使用帶濾芯的槍頭,，吸取不同樣品時請更換槍頭。
5. 推薦在帶熱蓋的PCR儀中進行各步驟反應,，使用前應預熱PCR儀至反應溫度附近,。
6. PCR產(chǎn)物因操作不當極容易產(chǎn)生氣溶膠污染，進而影響實驗結(jié)果準確性,。推薦將PCR反應體系配制區(qū)和PCR產(chǎn)物純化檢測區(qū)進行強制性的物理隔離,；使用專用的移液器等設(shè)備；并定時對各實驗區(qū)域進行清潔（使用0.5%次氯酸鈉或10%漂白劑進行擦拭清理）,，以保證實驗環(huán)境的潔凈度,。
7. 本產(chǎn)品僅作科研用途！
案例展示
a. gDNA樣本建庫示例
圖 2：human gDNA 樣本 bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫示意圖
注：50 ng human gDNA使用ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后,，全部投入建庫,，PCR 擴增10 cycle 得到的文庫產(chǎn)量約為20×58.2 ng；
b. FFPE DNA樣本建庫示例
圖 3：FFPE DNA 樣本bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫示意圖
注：50 ng FFPE DNA 使用ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后,，全部投入建庫,，PCR 擴增 10 cycle 得到的文庫產(chǎn)量約為 20×74.8 ng；
c. cfDNA樣本建庫示例
圖 4：cfDNA 樣本 bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫示意圖
注：10ng cfDNA 使用 ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后，全部投入建庫,，PCR 擴增 11 cycle 得到的文庫產(chǎn)量約為 20×54.4 ng,；
常見問題
DNA 文庫產(chǎn)量偏低，出現(xiàn)接頭二聚體,，大片段等問題,，可以考慮從如下方面進行優(yōu)化：
a)文庫產(chǎn)量偏低，應考慮樣本溶液中含有酶抑制劑組分,，建議再次純化,；
b)文庫出現(xiàn)接頭二聚體，推薦在互補鏈延伸之后進行2輪純化,，在第一輪純化后用50 μL洗脫,，然后加入1.2×beads (60 μL)進行再次純化；
c)對于文庫大片段的出現(xiàn),，考慮是過度擴增引起,，可以適當減少擴增循環(huán)數(shù)。
