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12221ESHieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit fo
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 12221ES 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):185更新時間:2025-02-07 13:51:26

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 應用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina V2是針對Illumina®測序平臺專業(yè)開發(fā)設(shè)計的新一代DNA甲基化建庫試劑盒,,在前一代建庫試劑盒的基礎(chǔ)上,,改善了接頭連接效率,,并采用了更加新型的高保真酶,,顯著提高擴增均一性和保真性,。適用于各種經(jīng)Bisulfite處理的樣本類型,,包括gDNA,、FFPE DNA,、cell free DNA
產(chǎn)品介紹

Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina V2是針對Illumina®測序平臺專業(yè)開發(fā)設(shè)計的新一代DNA甲基化建庫試劑盒,在前一代建庫試劑盒的基礎(chǔ)上,,改善了接頭連接效率,,并采用了更加新型的高保真酶,顯著提高擴增均一性和保真性。適用于各種經(jīng)Bisulfite處理的樣本類型,,包括gDNA,、FFPE DNA、cell free DNA (cfDNA),、ChIP DNA等,,可以滿足Bisulfite處理后的10 pg~250 ng DNA樣本建庫。該試劑盒可兼容短至40 bp的DNA樣本,。本產(chǎn)品不僅更加經(jīng)濟,,同時也提供了簡便快速的建庫流程,一般在2小時左右可以完成正常建庫,。

 

運輸與保存方法

冰袋運輸,。所有組分-20 °C保存,有效期1年,。

 

注意事項

一,、關(guān)于操作

1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

2. 請于使用前將試劑盒各組分置于室溫解凍,。解凍后上下顛倒數(shù)次充分混勻,短暫離心后置于冰上待用,。

3. 配制各步驟反應液時推薦使用移液器吹打混勻或輕輕振蕩,,劇烈振蕩可能會造成文庫產(chǎn)出下降。

4. 為避免樣品交叉污染,,推薦使用帶濾芯的槍頭,,吸取不同樣品時請更換槍頭。

5. 推薦在帶熱蓋的PCR儀中進行各步驟反應,,使用前應預熱PCR儀至反應溫度附近,。

6. PCR產(chǎn)物因操作不當極容易產(chǎn)生氣溶膠污染,進而影響實驗結(jié)果準確性,。推薦將PCR反應體系配制區(qū)和PCR產(chǎn)物純化檢測區(qū)進行強制性的物理隔離,;使用專用的移液器等設(shè)備;并定時對各實驗區(qū)域進行清潔(使用0.5%次氯酸鈉或10%漂白劑進行擦拭清理),,以保證實驗環(huán)境的潔凈度,。

7. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

 

案例展示

a. gDNA樣本建庫示例

Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® V2

 2:human gDNA 樣本 bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫示意圖

50 ng human gDNA使用ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后,,全部投入建庫,,PCR 擴增10 cycle 得到的文庫產(chǎn)量約為20×58.2 ng;

b. FFPE DNA樣本建庫示例

Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® V2

 3:FFPE DNA 樣本bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫示意圖

50 ng FFPE DNA 使用ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后,,全部投入建庫,,PCR 擴增 10 cycle 得到的文庫產(chǎn)量約為  20×74.8 ng;

c. cfDNA樣本建庫示例

Hieff NGS® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® V2

 4:cfDNA 樣本 bisulfite 處理后的 Aligent 2100 建庫示意圖

10ng cfDNA 使用 ZYMO EZ DNA Methylation-Gold Kit (D5005)處理后全部投入建庫,,PCR 擴增 11 cycle 得到的文庫產(chǎn)量約為 20×54.4 ng,;

 

常見問題

DNA 文庫產(chǎn)量偏低,出現(xiàn)接頭二聚體,,大片段等問題,,可以考慮從如下方面進行優(yōu)化:

  1. a)文庫產(chǎn)量偏低,應考慮樣本溶液中含有酶抑制劑組分,,建議再次純化,;

  2. b)文庫出現(xiàn)接頭二聚體,推薦在互補鏈延伸之后進行2輪純化,,在第一輪純化后用50 μL洗脫,,然后加入1.2×beads (60 μL)進行再次純化;

  3. c)對于文庫大片段的出現(xiàn),,考慮是過度擴增引起,,可以適當減少擴增循環(huán)數(shù)。

 




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