聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年
40275ES60488 EdU細胞成像試劑盒(綠色熒光)
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 40275ES60 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：463更新時間：2022-05-08 19:53:41
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100t |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40275ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號
規(guī)格
價格（元）
*（元）
Yefluor 488 EdU Imaging Kit
Yefluor 488 EdU細胞成像試劑盒（綠色熒光）
40275ES60
100 T
1583.00
1504.00
40275ES76
500 T
3183.00
3024.00
40275ES80
1,000T
4983.00
4734.00
產(chǎn)品描述
細胞增殖檢測是評估細胞健康程度,、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。常用的檢測細胞增殖方法是BrdU法,。EdU法檢測是Brdu方法的升級和突破,。EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）是一種嘧啶類似物，可在DNA合成期整合入DNA雙鏈,。EdU法檢測是基于“點擊"反應(yīng),，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應(yīng)。
試劑盒中EdU試劑含有炔烴,，而Yefluor 488 Azide染料試劑含有疊氮化合物,。點擊法的EdU標(biāo)記增殖快速有效，易于使用,。只需少量的疊氮化染料即可有效地標(biāo)記出整合的EdU,。標(biāo)準(zhǔn)化的戊二醛固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞,，而Brdu方法則需要DNA變性（如酸變性、熱變性或者用DNase消化）去暴露BrdU從而方便BrdU抗體結(jié)合,。
本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組份,，可以檢測細胞增殖與細胞周期分析。對于細胞周期的分析,，試劑盒提供了細胞核染料Hoechst 33342,。
光譜特性：Yefluor 488 Azide：Ex/Em=495/519 nm；Hoechst 33342：Ex/Em=350/461nm, bound to DNA,。
產(chǎn)品組分
編號
組分名稱
產(chǎn)品編號/規(guī)格
保存條件
40275ES60（100T）
40275ES76（500T）
40275ES80（1000T）
40275-A
10 mM EdU
0.2 mL
1 mL
2 mL
-20℃
40275-B
Yefluor 488 Azide
20 µL
100 µL
200 µL
-20℃避光
40275-C
10× Click-iT EdU反應(yīng)緩沖液
1 mL
5 mL
10 mL
2-8℃
40275-D
CuSO4
0.5 mL
2.5 mL
5 mL
2-8℃
40275-E
Click-iT EdU緩沖液添加物
30 mg
150 mg
150×2 mg
2-8℃
40275-F
Hoechst 33342
25 µL
125 µL
250 µL
2-8℃
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸,。-20℃避光保存，有效期1年,。
注意事項
1．為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2．本產(chǎn)品僅作科研用途,！
其他所需試劑
10 mM PBS, pH7.2-7.6
中性多聚甲醛固定液（4%多聚甲醛 in PBS ）
2 mg/ml 甘氨酸溶液（去離子水配制）
促滲試劑（0.5% Triton X-100 in PBS）
3% BSA in PBS, pH7.2-7.6
去離子水
18×18 mm 蓋玻片
使用方法
1,、EdU標(biāo)記細胞
注意：EdU的標(biāo)記濃度應(yīng)根據(jù)所用的細胞類型做相應(yīng)的優(yōu)化選擇，推薦客戶以10 μM的EdU初始濃度進行摸索,。細胞培養(yǎng)基,、細胞生長密度及細胞類型和其他實驗條件都有可能影響細胞的標(biāo)記效果。預(yù)實驗中我們建議客戶設(shè)置一系列的EdU濃度梯度,，以確定最佳的合適您的細胞的實驗濃度,。
1.1. 以每孔4×103-1×105細胞接種于96孔板中，進行您所需要的藥物處理或者其他刺激處理,。
1.2. 準(zhǔn)備一份2×的EdU工作液（組分A）：以*培養(yǎng)基稀釋10 mM的儲液至合適的工作濃度,。建議您以10 μM的初始工作濃度開始預(yù)實驗。
1.3. 預(yù)熱2×的EdU工作液,，加入等體積的培養(yǎng)基,，使?jié)舛茸優(yōu)?×(如：需要得到10 μM的終濃度，應(yīng)以新鮮培養(yǎng)基等體積加入到20 μM的EdU工作液中),。
1.4. 合適時間合適條件孵育細胞,，EdU孵育細胞的時間可以直接用作測定細胞DNA合成的指標(biāo)，時間點選擇以及孵育時間的長度取決于細胞生長速率,。通過短暫的EdU孵育進行的脈沖式標(biāo)記細胞可以用于研究細胞周期動力學(xué),。
2、細胞固定及促滲操作
2.1. 孵育完成后,，去除培養(yǎng)基加入50 μL 4%中性多聚甲醛至各個孔,，室溫孵育15-30 min后，去除固定液,。
2.2. 每孔加入50 μL 2 mg/mL甘氨酸溶液,，室溫孵育5 min,，中和殘留的固定液。
2.3. 以每孔0.1 mL 3% BSA in PBS的洗滌液洗滌細胞2次,。
2.4. 去除洗滌液,，加入0.1 mL 0.5% Triton X-100 in PBS到每個孔中，室溫孵育20 min,。
注意：本參考步驟是針對以4%中性多聚甲醛固定且以0.5% Triton X-100促滲操作樣本而優(yōu)化的操作方法,，但本參考所介紹的步驟同樣可用于其他類似操作的樣本，如以甲醇固定以皂苷固定的樣本等,。
3,、EdU檢測
注：本參考步驟每孔反應(yīng)使用100μL的Click-iT反應(yīng)混合物。用戶可根據(jù)自己的樣本情況調(diào)整等比例減少所用的溶液體積,。
3.1. 準(zhǔn)備1× Click-iTEdU反應(yīng)緩沖液（組分C）：10×組分C試劑以去離子水稀釋10倍即可,。
3.2. 制備一份5×的Click-iTEdU反應(yīng)添加物儲液（組分E）：加0.3 mL去離子水至30 mg的E組分試管中（100 mg/mL），混勻至全部溶解,。使用后,，剩余儲液存放在≤-20℃，可保存一年,，溶液一旦呈現(xiàn)棕色,，則說明有效成分降解不能再用（注意：不同規(guī)格的組分E均按照此比例加去離子水溶解為5×儲液備用）。
3.3. 準(zhǔn)備1× Click-iTEdU緩沖液添加物：以去離子水稀釋5×儲液（組分E）至1×,，溶液應(yīng)新鮮配置,，當(dāng)天用完。
3.4. 依據(jù)表1準(zhǔn)備Click-iT反應(yīng)混合物,。表1要求添加的組分對于反應(yīng)來說非常重要，否則反應(yīng)無法有效進行,。
表1 Click-iT反應(yīng)混合物
反應(yīng)組分
以10個孔的樣本數(shù)為例
1× Click-iT EdU反應(yīng)緩沖液（組分C）
860 µL
CuSO4 （組分D）
40 µL
Yefluor 488Azide（組分B）
2 µL
1×反應(yīng)緩沖液添加物（步驟3.3所準(zhǔn)備）
100 µL
總體積
1 mL
3.5. 去除促滲劑,，以每孔0.1 mL的3% BSA in PBS的洗滌液洗滌2次，去除洗滌液,。
3.6. 加入0.1 mL Click-iT反應(yīng)混合物至每個孔,，簡短搖晃培養(yǎng)板以確保反應(yīng)混合物可以均勻覆蓋細胞。
3.7. 室溫避光孵育30 min,。
3.8. 除去反應(yīng)混合物,，每孔以0.1 mL 3% BSA in PBS洗滌兩次，去除洗滌液,。
對于核染色,，可以進行DNA復(fù)染。如其他無特別要求,，即可進行拍照分析,。
4,、DNA復(fù)染（可選）
4.1. 以0.1 mL PBS洗滌每孔1次，去掉洗滌液,。
4.2. 以PBS稀釋Hoechst 33342（組分F）儲液1:2,000至1× Hoechst 33342溶液,，終濃度為5 µg/mL。
4.3. 每孔加0.1 mL 1× Hoechst 33342溶液,，室溫避光孵育15-30 min,。除去Hoechst 33342溶液。
4.4. 0.1 mL PBS洗滌每孔2次,，去除洗滌液,。
HB220418
相關(guān)產(chǎn)品
-
￥面議
