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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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41209ES04乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 41209ES04 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問(wèn)次數(shù):381更新時(shí)間:2022-01-28 14:08:07

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4T
貨號(hào) 41209ES04 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),,存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿、唾液、尿液,、羊水以及其它生物體液中。Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì),、脂類(lèi),、DNA和RNA等重要信息,不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物,。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Milk)

乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus

41209ES04

4 T

955.00

41209ES20

20 T

4255.00

 

產(chǎn)品描述

 

Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),;存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清、血漿,、唾液,、尿液、羊水以及其它生物體液中,;Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì),、脂類(lèi)、DNA和RNA等重要信息,,不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。

本試劑盒采用*的分離技術(shù),,可以快速?gòu)娜橐褐蝎@得大量完整的外泌體顆粒,,適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡分析,、Western Blot,、熒光定量(qPCR)和高通量測(cè)序等應(yīng)用。

 

產(chǎn)品組分

 

編號(hào)

組分

產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格

41209ES04

41209ES20

41209-A

Buffer-A

10 mL

50 mL

41209-B

Buffer-B

10 mL

50 mL

41209-C

Buffer-C

10 mL

50 mL

41209-D

Buffer-D

20 mL

100 mL

41209-E

50 mL過(guò)濾柱

4個(gè)

20個(gè)

 

運(yùn)輸和保存方法

 

室溫運(yùn)輸,,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個(gè)月,。

 

注意事項(xiàng)

 

1、產(chǎn)品只針對(duì)乳液樣本,,不適用其它血清/血液或者是細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提,;如果需要進(jìn)行細(xì)胞上清外泌體分離,請(qǐng)選用細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒,。

2,、如果想要進(jìn)一步純化外泌體,可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化,。

3,、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

4,、本產(chǎn)品僅作科研用途,!

 

操作方法

 

樣品預(yù)處理:

1、收集新鮮的樣品,,置于冰上待用,;若為凍存的樣品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,,待*融化后置于冰上待用,。

2、取25 mL(單次樣品最佳提取量為50 mL)乳液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,,4℃,,10000×g離心20 min,轉(zhuǎn)移分層樣品中的中層乳清至新的離心管中,。(離心后樣品分為三層,,上層為脂質(zhì)層,,中層為乳清層,,下層為蛋白層。脂質(zhì)層應(yīng)致密,、穩(wěn)定,,若脂質(zhì)層松軟,不穩(wěn)定,,且蛋白層沉淀較多,,可重復(fù)此步驟。)

3,,向乳清中加入Buffer-A,,顛倒混勻離心管至呈現(xiàn)半透明狀,再加入Buffer-B,,顛倒混勻后2℃至8℃靜置10min,。(靜置結(jié)束后搖晃離心管,樣品應(yīng)呈現(xiàn)白色固體和透明液體混合物,,若樣品仍為乳白色或是未呈現(xiàn)混合狀,,可以適當(dāng)加入Buffer-A至液體透明。)

乳清體積

Buffer-A

Buffer-B

20 mL

2 mL

1.5 mL

40 mL

4 mL

3 mL

【注】:試劑用量可根據(jù)此表進(jìn)行等比例換算,。

4,,將樣品于4℃,10000×g離心10 min,,收集上清液轉(zhuǎn)移至50 mL過(guò)濾柱中,,4℃,3000×g離心2min,。

5,,收集過(guò)濾后的上清液至新的離心管中,,加入和Buffer-B等量的Buffer-C顛倒混勻。

外泌體分離:

1,、向預(yù)處理后的樣品中,,按照下表加入Exosome isolation solution (其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進(jìn)行等比例變換)。

預(yù)處理樣品量

Buffer-D

20 mL

5 mL

40 mL

10 mL

【注】:試劑用量可根據(jù)此表進(jìn)行等比例換算,。

2,、蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,,放置于4℃冰箱靜置2 h,。

3、取出裝有混合液的離心管,,4℃,,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),,收集富含外泌體的沉淀,。

4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物,,待其充分懸浮于PBS后,,將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。

【注】加入1×PBS的量,,建議根據(jù)預(yù)處理樣本的體積決定,,預(yù)處理樣本體積:Exosome Buffer體積=40:1。

5,、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,,12,000×g離心5 min,棄沉淀,,保留上清液,,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。

【注】此時(shí)如果依然可以看到明顯的沉淀,,建議重復(fù)步驟5,,多次離心至無(wú)明顯沉淀。

6)外泌體的保存:純化后的外泌體可于4℃保存3天,,分裝后于-80℃ 長(zhǎng)期保存,,避免反復(fù)凍融。

外泌體除菌(可選):

獲得的外泌體后期需要與細(xì)胞共培養(yǎng),,可以使用0.22 μm的濾器進(jìn)行過(guò)濾除菌,。初次嘗試時(shí),外泌體濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索,,選擇一個(gè)較為合適的條件,。

 

HB220107



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