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41209ES04乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 41209ES04 產品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產商 廠商性質
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):349更新時間:2022-01-28 14:08:07

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產品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4T
貨號 41209ES04 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè)
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,,具有典型的脂質雙分子層結構,存在于細胞培養(yǎng)上清液,、血清、血漿,、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中,。Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類,、DNA和RNA等重要信息,,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物,。
產品介紹

產品信息

 

產品名稱

產品編號

規(guī)格

價格(元)

Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Milk)

乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus

41209ES04

4 T

955.00

41209ES20

20 T

4255.00

 

產品描述

 

Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,,具有典型的脂質雙分子層結構;存在于細胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿、唾液,、尿液,、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質,、脂類、DNA和RNA等重要信息,,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物,。

本試劑盒采用*的分離技術,可以快速從乳液中獲得大量完整的外泌體顆粒,,適用于下游的細胞共培養(yǎng),、電鏡分析、Western Blot,、熒光定量(qPCR)和高通量測序等應用,。

 

產品組分

 

編號

組分

產品編號/規(guī)格

41209ES04

41209ES20

41209-A

Buffer-A

10 mL

50 mL

41209-B

Buffer-B

10 mL

50 mL

41209-C

Buffer-C

10 mL

50 mL

41209-D

Buffer-D

20 mL

100 mL

41209-E

50 mL過濾柱

4個

20個

 

運輸和保存方法

 

室溫運輸,,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個月,。

 

注意事項

 

1,、產品只針對乳液樣本,不適用其它血清/血液或者是細胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進行細胞上清外泌體分離,,請選用細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒,。

2、如果想要進一步純化外泌體,,可以使用相應抗體包被的磁珠進行親和純化,。

3、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

4、本產品僅作科研用途,!

 

操作方法

 

樣品預處理:

1,、收集新鮮的樣品,,置于冰上待用;若為凍存的樣品,,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,,待*融化后置于冰上待用。

2,、取25 mL(單次樣品最佳提取量為50 mL)乳液樣品轉移至離心管中,,4℃,10000×g離心20 min,,轉移分層樣品中的中層乳清至新的離心管中,。(離心后樣品分為三層,上層為脂質層,,中層為乳清層,,下層為蛋白層。脂質層應致密,、穩(wěn)定,,若脂質層松軟,不穩(wěn)定,,且蛋白層沉淀較多,,可重復此步驟。)

3,,向乳清中加入Buffer-A,,顛倒混勻離心管至呈現(xiàn)半透明狀,再加入Buffer-B,,顛倒混勻后2℃至8℃靜置10min,。(靜置結束后搖晃離心管,樣品應呈現(xiàn)白色固體和透明液體混合物,,若樣品仍為乳白色或是未呈現(xiàn)混合狀,,可以適當加入Buffer-A至液體透明。)

乳清體積

Buffer-A

Buffer-B

20 mL

2 mL

1.5 mL

40 mL

4 mL

3 mL

【注】:試劑用量可根據(jù)此表進行等比例換算,。

4,,將樣品于4℃,10000×g離心10 min,,收集上清液轉移至50 mL過濾柱中,,4℃,3000×g離心2min,。

5,,收集過濾后的上清液至新的離心管中,加入和Buffer-B等量的Buffer-C顛倒混勻,。

外泌體分離:

1,、向預處理后的樣品中,,按照下表加入Exosome isolation solution (其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進行等比例變換)。

預處理樣品量

Buffer-D

20 mL

5 mL

40 mL

10 mL

【注】:試劑用量可根據(jù)此表進行等比例換算,。

2,、蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,,放置于4℃冰箱靜置2 h,。

3、取出裝有混合液的離心管,,4℃,,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),,收集富含外泌體的沉淀,。

4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物,,待其充分懸浮于PBS后,,將懸液轉移至新的1.5 mL離心管中。

【注】加入1×PBS的量,,建議根據(jù)預處理樣本的體積決定,,預處理樣本體積:Exosome Buffer體積=40:1。

5,、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,12,000×g離心5 min,,棄沉淀,,保留上清液,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液,。

【注】此時如果依然可以看到明顯的沉淀,,建議重復步驟5,多次離心至無明顯沉淀,。

6)外泌體的保存:純化后的外泌體可于4℃保存3天,,分裝后于-80℃ 長期保存,避免反復凍融,。

外泌體除菌(可選):

獲得的外泌體后期需要與細胞共培養(yǎng),,可以使用0.22 μm的濾器進行過濾除菌。初次嘗試時,,外泌體濃度在10-100 μg/mL內做梯度摸索,,選擇一個較為合適的條件。

 

HB220107



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