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Paraformaldehyde 多聚甲醛4%（含DEPC）

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

多聚甲醛（Paraformaldehyde），又稱聚縮醛,，為甲醛（Formaldehyde）的聚合物,。是一種殺菌劑、抗真菌劑,。免疫實驗中常作為一種固定劑用于細(xì)胞或組織樣品的固定,。在該應(yīng)用中，發(fā)揮固定作用的是單體甲醛,，因此,，使用前需將多聚甲醛經(jīng)過加熱使之轉(zhuǎn)化為單體甲醛。

本品為4%的多聚甲醛,，是一種蛋白交聯(lián)劑,，對組織穿透性好，組織收縮小,。且溶液較溫和,，能很好保存組織的抗原性和細(xì)微結(jié)構(gòu)，適用于組織標(biāo)本和細(xì)胞涂片的固定,，主要用于免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）,、免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫電鏡等實驗,。另外,，本品使用經(jīng)DEPC處理的溶液體系（RNase-free）配置的4%多聚甲醛，除了可以做免疫組化實驗外,，還可以用于原位雜交實驗,。

運輸和保存方法

冰袋運輸。4℃避光保存,。有效期1年,。

使用說明

1.免疫組化

1）組織固定：室溫或4℃浸泡固定2-24 h，用緩沖液漂洗后即可樹脂包埋用于組織切片,。

注：依據(jù)切片的厚度來決定固定時間,，不要超過24 h。

2）切片固定：室溫或4℃固定10 min-2 h,，視切片厚度而定,，用緩沖液漂洗后即可用于染色。

3）細(xì)胞固定：室溫或4℃固定10-30 min,，用緩沖液漂洗后即可用于染色,。

2.原位雜交

注意：實驗過程要保證操作不受環(huán)境RNase影響，可用我司的RNase remover（固相RNse酶清除劑,，貨號：10609ES60）噴灑工作臺,，雜交爐等準(zhǔn)備潔凈環(huán)境；實驗操作中使用RNase-free的槍頭,，離心管,，蓋玻片，以及RNase-free的PBS或者SSC清洗液,。

1）組織固定：4℃浸泡固定2-24 h（邊搖晃）,，用RNase-free緩沖液（如DEPC-treated PBS）漂洗后即可用石蠟包埋用于組織切片；或者固定好的組織浸泡在30%蔗糖（溶于RNase-free PBS）4℃過夜,，搖晃,，使其沉浸在液面之下，即可用OCT包埋劑包埋用于組織切片,；

2）切片固定：

A,、用預(yù)冷的4%PFA于室溫固定10 min-20 min，視切片厚度而定,；

B,、用RNase-free緩沖液（如DEPC-treated PBS）漂洗3次，每次5 min,；

C,、用蛋白酶K（1 μg/mL in 50 mM Tris pH 8, 5 mM EDTA）低速搖晃，室溫處理5-45 min,；

D,、用預(yù)冷的4%PFA于室溫固定5-10 min，視切片厚度而定,，用RNase-free緩沖液（如DEPC-treated PBS）漂洗3次,，每次5min,；

E、在磁力攪拌器上準(zhǔn)備一水盤,，加入300 mL DEPC處理水和3.5 mL三乙醇胺（緩慢加入）,；

F、將固定后的切片放入上述水盤中,，并在切片上方滴750 μL無水醋酸,，邊攪拌邊孵育10 min。

G,、用DEPC處理的PBS清洗3次,，5 min/次；之后進入后續(xù)的雜交實驗,。

注意事項

1）甲醛有毒,，請注意防護。

2）為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

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