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HB180514

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads (50 bp以上)

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads針對AMPure XP磁珠對長度低于200 bp的小片段DNA回收效果不佳而專門設(shè)計,。本產(chǎn)品基于SPRI（Solid Phase Reverse Immobilization）原理制備,，采用超順型磁珠，配合*的緩沖體系,，提供了一種簡單,、快速、高效的DNA回收方法,。本產(chǎn)品可特異性吸附DNA,，回收低至50 bp的DNA-片段，并有效去除引物二聚體,、dNTP,、無機鹽及蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，得到高質(zhì)量的DNA回收產(chǎn)物,。

· 適用范圍廣：50 bp-20 kb DNA-片段,；

· 回收率高：高達85%以上；

· 純化力好：DNA產(chǎn)物A_260/280=1.8-2.0,；

· 操作簡便：30 min內(nèi)完成整個操作流程,，無需反復(fù)離心；

· 應(yīng)用多樣：PCR產(chǎn)物純化,、酶切產(chǎn)物純化,、cfDNA回收、NGS建庫產(chǎn)物回收,；

· 產(chǎn)物下游應(yīng)用：酶切,、連接、克隆,、NGS建庫等。

運輸與保存方法

冰袋運輸。2-8℃保存,，效期一年,。避免冷凍！

注意事項

1）為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。

3）80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配,，否則將影響回收效率,。

4）進行長度分選時，初始樣品體積需≥100 μL,，不足時請用超純水補齊,。樣品體積太小，將導(dǎo)致移液誤差增大,，進而影響分選的準確性,。

使用方法

1. 操作流程

圖1 Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads操作流程

2. 操作步驟

1）將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min,。配制80%乙醇,。

2）渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證充分混勻。

3）按下表吸取不同比例的Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads至DNA溶液中,，室溫孵育5 min,。

表1磁珠DNA-片段回收推薦比例

注：表中“×”表示樣品DNA體積。如需回收≥50 bp的DNA-片段,，樣品DNA體積為100 mL,，則磁珠使用體積為2.2×100 mL=220 mL。

4）將PCR管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體,，待溶液澄清后（約5 min）,，小心移除上清。【注意：勿吸取磁珠,。】

5）保持PCR管始終置于磁力架中,，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 sec后,，小心移除上清,。

6）重復(fù)步驟5，總計漂洗2次,。

7）保持PCR管始終置于磁力架中,，開蓋空氣干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂（約5 min）。【注意：切記磁珠不要干燥時間太久,，磁珠干燥過度將影響純化效果,。】

8）將PCR管從磁力架中取出，加入21 μL ddH₂O (≥20 μL),，渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打至充分混勻,，室溫靜置5 min。

9）將PCR管短暫離心并置于磁力架中靜置,，待溶液澄清后（約5 min）,，小心移取20 μL上清至新PCR管中，勿觸碰磁珠,。

10）檢測DNA濃度與純化效果,。

3. 純化示例

Hieff NGS^TM Smarter DNA Clean Beads相對AMPure XP磁珠，回收DNA效果更好,。

圖2 不同比例磁珠純化DNA電泳圖