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參考價: | 面議 |
- 10222ES60 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):788更新時間:2025-02-07 13:46:34
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ul |
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貨號 | 10222ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液,。
產(chǎn)品簡介
SYBR Green I,一種靈敏度非常高的dsDNA熒光染料,,常用于核酸瓊脂糖凝膠/聚丙烯酰胺凝膠電泳,。SYBR Green I染料的最大激發(fā)波長為497 nm,但是在~290 nm和~380 nm處有二級激發(fā)峰,。與DNA結(jié)合的SYBR Green I染料的熒光發(fā)射集中在520 nm,。因此,該染料可適用于多種凝膠檢測儀,。
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液,。
產(chǎn)品信息
貨號 | 10222ES60 / 10222ES76 / 10222ES86 / 10222ES90 |
規(guī)格 | 100 µL / 500 µL / 5×500 µL / 10×500 µL |
儲存條件
-25~-15℃保存,有效期1年,。
使用說明
【開始使用前】
使用前將本品取出并回溫至室溫,,使DMSO 解凍、溶液均一,。于離心機上短暫離心確保所有溶液至管底,。第一次使用時可將本品分裝成多個小份后凍存,小份染料將更快速溶解,。
染色
1)電泳后DNA染色
a. 在瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳。
*TBE和TAE緩沖液均適合于SYBR Green I染料,。
b. 用TE,、TAE或TBE將SYBR Green I進行10,000倍稀釋。
① SYBR Green I染色對pH敏感,,為獲得最佳的靈敏度,,應(yīng)確認在染色溫度下染色液的pH值在7.5-8.0之間(pH8.0更佳)。
② 用水配制的染色液不如用緩沖液配制的穩(wěn)定,,為得到較好靈敏度,,必須在24 h內(nèi)使用,。
c. 染液要充分覆蓋凝膠,室溫輕搖孵育10-40 min,。
① 推薦用塑料而不是玻璃容器來儲存染色液,,因為染料會吸附到玻璃表面。
② 染色過程避光進行,,建議在容器上加蓋鋁箔或置于暗處,。
③ 凝膠厚度及瓊脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色時間將有所不同,。
④ 無需脫色,。
⑤ 染液可置暗處(最好是冷藏)放置至少1周,重復(fù)使用最多4次,。
2)電泳前DNA染色
a. 一般選擇配制成SYBR Green I預(yù)制凝膠來實驗,。
臨灌膠前將SYBR Green I儲存液按照1:10,000倍稀釋到凝膠溶液中,預(yù)制成含有SYBR Green I染料的瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠,。預(yù)制的SYBR Green I凝膠的DNA檢測下限(大約為30-40 pg/條帶),,略高于電泳后染色(<20 pg/條帶)。此外,,在SYBR Green I凝膠中的DNA片段遷移率明顯比無染料凝膠中的相同片段慢,。
b. 作為DNA模板預(yù)染標記。
一般而言,,DNA在電泳前與染料工作液至少孵育15 min,。
凝膠成像(紫外或藍光透射儀或紫外頂置光源直射)
可在紫外或藍光光源下輕松觀察到用SYBR Green I染色的DNA。
從雙鏈DNA中去除SYBR Green I
將SYBR Green I染色的DNA移至100 mM NaCl中,,加入2.5倍體積的無水或95%的乙醇,。在冰上孵育約20 min,在4℃離心至少10 min,。去除乙醇,,并用70%乙醇洗滌沉淀。讓乙醇揮發(fā),,用TE重懸雙鏈DNA即可,。
注意事項
獨立實驗室進行的艾姆斯試驗表明SYBR Green I 的致突變性明顯比溴化乙錠要低得多,目前尚無關(guān)于SYBR Green I 染料對人體的致突變性或毒性的數(shù)據(jù),,但我們必須提醒用戶注意,,該染料能與DNA結(jié)合,因此,,它應(yīng)當被看作潛在誘變劑,,在使用前小心謹慎。另外,在處理DMSO儲存液時應(yīng)特別小心,,因為DMSO能促進有機分子進入組織,。染料的處理應(yīng)當符合當?shù)氐囊?guī)定。
為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
本產(chǎn)品僅作科研用途!