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參考價(jià): | 面議 |
- 10222ES60 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):771更新時(shí)間:2025-02-07 13:46:34
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ul |
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貨號(hào) | 10222ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液,。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
SYBR Green I,一種靈敏度非常高的dsDNA熒光染料,,常用于核酸瓊脂糖凝膠/聚丙烯酰胺凝膠電泳,。SYBR Green I染料的最大激發(fā)波長(zhǎng)為497 nm,,但是在~290 nm和~380 nm處有二級(jí)激發(fā)峰。與DNA結(jié)合的SYBR Green I染料的熒光發(fā)射集中在520 nm,。因此,該染料可適用于多種凝膠檢測(cè)儀,。
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液,。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 10222ES60 / 10222ES76 / 10222ES86 / 10222ES90 |
規(guī)格 | 100 µL / 500 µL / 5×500 µL / 10×500 µL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期1年,。
使用說(shuō)明
【開(kāi)始使用前】
使用前將本品取出并回溫至室溫,,使DMSO 解凍、溶液均一,。于離心機(jī)上短暫離心確保所有溶液至管底,。第一次使用時(shí)可將本品分裝成多個(gè)小份后凍存,小份染料將更快速溶解,。
染色
1)電泳后DNA染色
a. 在瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳,。
*TBE和TAE緩沖液均適合于SYBR Green I染料。
b. 用TE,、TAE或TBE將SYBR Green I進(jìn)行10,000倍稀釋,。
① SYBR Green I染色對(duì)pH敏感,為獲得最佳的靈敏度,,應(yīng)確認(rèn)在染色溫度下染色液的pH值在7.5-8.0之間(pH8.0更佳),。
② 用水配制的染色液不如用緩沖液配制的穩(wěn)定,為得到較好靈敏度,,必須在24 h內(nèi)使用,。
c. 染液要充分覆蓋凝膠,室溫輕搖孵育10-40 min,。
① 推薦用塑料而不是玻璃容器來(lái)儲(chǔ)存染色液,,因?yàn)槿玖蠒?huì)吸附到玻璃表面。
② 染色過(guò)程避光進(jìn)行,,建議在容器上加蓋鋁箔或置于暗處,。
③ 凝膠厚度及瓊脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色時(shí)間將有所不同,。
④ 無(wú)需脫色,。
⑤ 染液可置暗處(最好是冷藏)放置至少1周,重復(fù)使用最多4次,。
2)電泳前DNA染色
a. 一般選擇配制成SYBR Green I預(yù)制凝膠來(lái)實(shí)驗(yàn),。
臨灌膠前將SYBR Green I儲(chǔ)存液按照1:10,000倍稀釋到凝膠溶液中,預(yù)制成含有SYBR Green I染料的瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠,。預(yù)制的SYBR Green I凝膠的DNA檢測(cè)下限(大約為30-40 pg/條帶),,略高于電泳后染色(<20 pg/條帶),。此外,在SYBR Green I凝膠中的DNA片段遷移率明顯比無(wú)染料凝膠中的相同片段慢,。
b. 作為DNA模板預(yù)染標(biāo)記,。
一般而言,DNA在電泳前與染料工作液至少孵育15 min,。
凝膠成像(紫外或藍(lán)光透射儀或紫外頂置光源直射)
可在紫外或藍(lán)光光源下輕松觀察到用SYBR Green I染色的DNA,。
從雙鏈DNA中去除SYBR Green I
將SYBR Green I染色的DNA移至100 mM NaCl中,加入2.5倍體積的無(wú)水或95%的乙醇,。在冰上孵育約20 min,,在4℃離心至少10 min。去除乙醇,,并用70%乙醇洗滌沉淀,。讓乙醇揮發(fā),用TE重懸雙鏈DNA即可,。
注意事項(xiàng)
獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的艾姆斯試驗(yàn)表明SYBR Green I 的致突變性明顯比溴化乙錠要低得多,,目前尚無(wú)關(guān)于SYBR Green I 染料對(duì)人體的致突變性或毒性的數(shù)據(jù),但我們必須提醒用戶(hù)注意,,該染料能與DNA結(jié)合,,因此,它應(yīng)當(dāng)被看作潛在誘變劑,,在使用前小心謹(jǐn)慎,。另外,在處理DMSO儲(chǔ)存液時(shí)應(yīng)特別小心,,因?yàn)镈MSO能促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織,。染料的處理應(yīng)當(dāng)符合當(dāng)?shù)氐囊?guī)定。
為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
本產(chǎn)品僅作科研用途!