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參考價(jià): | 面議 |
- 36222ES60 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):956更新時(shí)間:2022-02-10 14:07:33
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 | 36222ES60 | 100 mL | 325.00 |
36222ES76 | 500 mL | 1255.00 |
產(chǎn)品描述
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原,。其原理是,蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,,以一抗及HRP標(biāo)記的二抗結(jié)合膜上的目的蛋白,或以HRP標(biāo)記的探針直接或間接結(jié)合膜上的核酸,。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液,室溫孵育膜數(shù)分鐘,,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒,。然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)小時(shí),,顯影定影后蛋白質(zhì)或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。
本試劑盒采用了*的發(fā)光底物系統(tǒng),,降低曝光背景的同時(shí)引入新型的氧化劑,,大大提高試劑盒的穩(wěn)定性,使其在室溫能穩(wěn)定放置一年,。除用于X光片,還可直接使用熒光CCD掃描,,主要用于WB檢測(cè)以及化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)系統(tǒng),。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
36222ES60(100 mL) | 36222ES76(500 mL) | ||
36222-A | A液 | 50 mL | 250 mL |
36222-B | B液 | 50 mL | 250 mL |
運(yùn)輸與保存方法
常溫運(yùn)輸。
頻繁使用可置于室溫保存,,一年穩(wěn)定,;長(zhǎng)期不用,,建議置于4 ºC保存延長(zhǎng)效期,。【注】:A液(36222-A)需避光保存!
操作方法(以X光膠片為例)
1. 執(zhí)行常規(guī)電泳,、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或者HRP標(biāo)記核酸探針孵育,、洗膜。
【注】:ECL發(fā)光液是HRP的顯色底物,,因此檢測(cè)系統(tǒng)終必須基于HRP酶標(biāo)記抗體或者核酸探針。
2. 后1次洗膜的同時(shí),,新鮮配制發(fā)光工作液(推薦100-200 μL發(fā)光液/cm2膜):分別取等體積的A液和B液,,混勻備用,。
【注】:取A液和B液一定要用不同的槍頭;另建議立即使用工作液,,室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降低。
3. 用平頭鑷取出膜,,搭在濾紙上瀝干洗液,,勿使膜*干燥,。用移液器將工作液加到膜上,使之充分接觸,。室溫孵育1-2 min,準(zhǔn)備立即壓片曝光,。
4. 用平頭鑷子夾起膜,,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,,去除膜上多余的液體,留下少量工作液,,不可讓膜*干燥,。
5. 在X光膠片暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜,。將印跡膜貼在保鮮膜上,,將保鮮膜折起來*包裹印跡膜,,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜,。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液,。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),,蛋白帶面向上。
6. 暗房?jī)?nèi)取一張X光膠片至于包裹的膜上,,壓片,,曝光30 sec-2 min,,顯影定影沖洗?!咀ⅰ浚浩毓鈺r(shí)間需根據(jù)曝光強(qiáng)度做相應(yīng)的調(diào)整。若是背景過高,,可使用兩張X光膠片同時(shí)壓片,。
其他曝光方法
如果使用CCD拍照:可以將膜放置于工作液中,,開機(jī)后按照使用說明,將膜取出,,進(jìn)行拍照。另外,,也可以根據(jù)情況,調(diào)整機(jī)器測(cè)量參數(shù),,提高信噪比。
注意事項(xiàng)
1)為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
2)轉(zhuǎn)膜,、封閉,、孵育都需要避免氣泡,另外戴手套可以避免在膜上留下手印,,保持膜的干凈。
3)長(zhǎng)時(shí)間曝光或蛋白過量,,將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。曝光不足則條帶模糊,。
4)某些保鮮膜包裹印跡膜時(shí)可能會(huì)淬滅熒光,,應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜,。
5)避免將多張膜置于同一個(gè)洗膜盒內(nèi)洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景,。
6)使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小,。
7)使用生物素-親和素系統(tǒng),,避免使用牛奶封閉,可能會(huì)導(dǎo)致背景過高,。
8)金屬氧化物顆粒可能會(huì)造成膜上出現(xiàn)顆粒狀斑點(diǎn),,避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子,,建議使用塑料的平頭鑷子,。
9)(NaN3)能抑制HRP活性,若回收HRP標(biāo)記探針或者抗體應(yīng)避免使用NaN3,,如必需使用勿超過0.01%,。
10)本品無特殊毒性,,按普通化學(xué)品處理。
問題與解決方案
遇到的問題 | 原因分析 | 推薦解決方法 |
膠片無條帶顯現(xiàn)或者信號(hào)較弱 | 轉(zhuǎn)膜的效率低 | 提高轉(zhuǎn)膜效率,,用預(yù)染Marker判斷。 |
抗原/抗體量少或不匹配 | 增加抗原/抗體量或選擇合適抗原/抗體 | |
X光膠片有問題 | 曝光后X光譜全黑(而非透明色),,則表明膠片已*曝光,,使用新的X光片 | |
顯影/定影液有問題 | 可預(yù)先曝光一張膠片進(jìn)行判斷,如有問題當(dāng)換用新的顯影/定影液 | |
反應(yīng)系統(tǒng)中HRP量過多 | 稀釋HRP標(biāo)記物 | |
X光片背景臟 | 一抗二抗?jié)舛忍?/span> | 降低抗體濃度,,延長(zhǎng)封閉時(shí)間 |
抗體未清洗干凈 | 增加洗膜次數(shù) | |
條帶有空斑 | 抗原以及二抗的濃度過高 | 稀釋樣品重新跑膠,也可將混合好的顯色液冰浴后,,加到膜上即刻快速顯色。 |
帶型不規(guī)則 | 轉(zhuǎn)膜有氣泡或甲醇(對(duì)于PVDF膜)水化不均勻 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件,。 |
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格( mL) | 價(jià)格(元) |
Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 | 36222ES60/76 | 100/500 | 325/1255 |
Super ECL Detection Reagent ECL化學(xué)發(fā)光超敏顯色試劑盒 | 36208ES60/76 | 100/500 | 395/1655 |
SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate持久性化學(xué)發(fā)光底物 | 36223ES10/60/70/76 | 10/100/200/500 | 267/1557/2857/5257 |
SuperSignal MaxiSignal Maximum Sensitivity Substrate高靈敏度化學(xué)發(fā)光底物 | 36224ES10/60/70/76 | 10/100/200/500 | 287/1757/3257/5857 |
HB181130