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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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36311ES64Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 36311ES64 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù)：611更新時(shí)間：2021-07-08 15:48:12
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100t |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 36311ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品描述
YEASEN IHC Kit for Mouse Primary Antibody可用于檢測(cè)以小鼠單克隆或多克隆抗體為一抗的免疫組化實(shí)驗(yàn),，檢測(cè)原理基于高特異性高親和力的鏈霉親和素-生物素結(jié)合：已固定或培養(yǎng)細(xì)胞的抗原與一抗形成抗原抗體復(fù)合物，生物素化二抗特異性結(jié)合上述復(fù)合物,，經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素特異性識(shí)別生物素（即抗原所在位置）,，最后經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶底物顯色即可檢測(cè)相應(yīng)抗原。
本品可適用于多種類(lèi)型樣本,，如石蠟包埋切片,、冰凍切片,、培養(yǎng)細(xì)胞涂片及血液標(biāo)本等。
產(chǎn)品組分
組分 | 組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
Part Ⅰ | 36311-A | 1×PBS緩沖液（干粉,，4L） | 1L×4袋 | 室溫 |
36311-B | 100×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液 | 32 mL | 2-8℃ | |
36311-C | 內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑（即用型） | 5 mL | 2-8℃ | |
36311-D | 抗體稀釋液（即用型） | 5 mL | 2-8℃ | |
36311-E | 封閉用正常山羊血清工作液（即用型） | 5 mL | 2-8℃ | |
36311-F | 生物素標(biāo)記羊抗小鼠IgG（即用型） | 5 mL | 2-8℃ | |
36311-G | 辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液（即用型） | 5 mL | 2-8℃ | |
36311-J | 蘇木素染液（即用型） | 6 mL | 室溫 | |
Part Ⅱ | 36311-H | DAB kit (20×)顯色液 | 0.5 mL | -20℃ |
36311-I | DAB kit (20×)稀釋液 | 0.5 mL | -20℃ |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸,。部分Ⅱ，H,I組分-20保存,，其他組分4℃保存,，有效期1年。勿冰凍,！
注意事項(xiàng)
1）為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2）DAB是一潛在致癌物,，使用時(shí)請(qǐng)注意自我防護(hù),。
3）檢測(cè)樣本時(shí)需同時(shí)做陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。
4）本產(chǎn)品僅作科研用途,！
準(zhǔn)備試劑
二甲苯,、乙醇、甲醇,、去離子水,、封片劑（Cat#36313）
使用方法
1.脫蠟水化。將石蠟切片置于新鮮二甲苯脫中浸泡15 min,，重復(fù)三次,。去除多余的液體后，依次置于無(wú)水乙醇,、95%乙醇,、90%乙醇、80%乙醇,、70%乙醇,，各浸泡5 min，蒸餾水（或自來(lái)水）沖洗5 min,。用PBS緩沖液（試劑A,，將干粉溶解于2 L去離子水中）沖洗切片5 min，重復(fù)三次,。
2.抗原修復(fù),。將脫蠟水化后的組織切片置于燒杯（或修復(fù)盒）中的耐高溫塑料切片架上，加適量修復(fù)液1×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液（試劑B,，將100×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液加去離子水稀釋成1×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液）,，液面要浸過(guò)切片組織一定高度，將修復(fù)盒置于沸水中煮沸修復(fù)15 min后取出玻片,，自然涼至室溫,。用PBS緩沖液沖洗切片5 min,，重復(fù)三次。注意：抗原修復(fù)時(shí),，修復(fù)液務(wù)必保證切片始終浸泡在液體內(nèi),，一般情況：修復(fù)液的量約為800 mL/1架。
3.阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,。用吸水紙擦干玻片,，免疫組化筆在組織周?chē)?huà)圈，滴加50μL內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑（試劑C）到切片組織上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,，室溫孵育30 min,，用PBS緩沖液沖洗切片5 min，重復(fù)三次,。
4.血清封閉,。用吸水紙擦干玻片，滴加50 μL正常山羊血清工作液（試劑E）,，37℃封閉20 min,，以減少非特異性染色。
5.一抗孵育,。用抗體稀釋液（試劑D）將一抗原液稀釋成工作液,，用吸水紙擦干玻片組織周?chē)囊后w，滴加適量抗體工作液,，置于孵育盒4℃孵育過(guò)夜或37℃孵育1h-2h,。
6.復(fù)溫。4℃過(guò)夜后從冰箱拿出樣本,，在室溫下孵育15 min 復(fù)溫（抗體孵育為4℃過(guò)夜選用此步驟,，如室溫孵育直接進(jìn)入下一步清洗）。用PBS緩沖液沖洗切片5 min,，重復(fù)三次,。
7.二抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加50 μL生物素標(biāo)記的羊抗小鼠IgG（試劑G）,，37℃孵育20 min,，用PBS緩沖液沖洗切片5 min，重復(fù)三次,。
8.三抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加50 μL辣根酶標(biāo)記的鏈酶卵白素孵育（試劑H）,，37℃孵育20 min,，用PBS緩沖液沖洗切片5 min，重復(fù)三次,。
9.顯色,。甩去PBS緩沖液,，吸水紙擦干切片；每張切片滴加新鮮配制的DAB工作液50 μL（試劑H：試劑I：試劑A=1:1:18 比例配置）,，孵育3-5 min,，光學(xué)顯微鏡下觀察染色結(jié)果，切勿顯色過(guò)深,；顯色后用自來(lái)水沖洗切片終止顯色,。
【注】① DAB顯色液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避光放置,，且在30 min內(nèi)使用,。
② 可根據(jù)需要一次染多張切片，各種試劑量按照上述比例放大即可,。
10.復(fù)染,。滴加適量蘇木素染液（試劑J）復(fù)染，孵育1-5 min,，自來(lái)水沖洗5 min,，滴加鹽酸酒精分化液分化30s，自來(lái)水沖洗,。
11.脫水封片,。將玻片依次置于70%乙醇、80%乙醇,、90%乙醇,、95%乙醇、無(wú)水乙醇,，各浸泡5 min,，再將玻片放入二甲苯中浸泡15 min，重復(fù)三次,。玻片取出來(lái)稍晾干,，用中性樹(shù)膠封片。
12.結(jié)果判定
在光學(xué)顯微鏡下對(duì)染色的切片觀察并判斷,。蘇木素染細(xì)胞核為藍(lán)色,，DAB顯色的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色。
HB210707
