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血管生成(angiogenesis )會與傷口愈合,、炎癥,、類風濕性關節(jié)炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變,、黃斑變性和腫瘤生長等存在著密切的關聯(lián),。在生物體生長過程中,血管生成是新組織生長的重要組成部分,。在成年期,,除在特殊器官中受到嚴格調(diào)節(jié)的周期性事件外,由于促血管生成和抗血管生成內(nèi)源性因素之間的平衡,,幾乎每個正常組織都缺乏大量的生理性血管生成,。當促血管生成方向的平衡被打亂時,微血管內(nèi)皮細胞 (EC) 會轉變?yōu)檠苌杀硇?,從而開始血管生成反應,,該反應可以被消除或加速。在研究過程中所涉及到血管生成實驗,,傳統(tǒng)的體內(nèi)血管生成實驗方法有:角膜微袋,、腸系膜、海綿/基質(zhì)植入物,、圓盤分析 (DAS),、斑馬魚等【1】。
在模型生成過程中的細胞生長維持基質(zhì)物就是來源與EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物——基質(zhì)膠來保證血管或膠塞實驗成功,。Ceturegel®基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),,超低內(nèi)毒素含量,并全部經(jīng)過支原體檢測保證無支原體污染,,包括基本濃度,、高濃度,、低生長因子等不同類型基質(zhì)膠。
Ceturegel®基質(zhì)膠
應用方向
產(chǎn)品特點
安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),;
濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/mL之間,;
批次穩(wěn)定性好:嚴格生產(chǎn)質(zhì)檢過程保證批次間性能穩(wěn)定;
低內(nèi)毒素:內(nèi)毒素含量<8 EU/mL,;
污染物檢測: 經(jīng)檢測無支原體和細菌,、真菌殘留;
產(chǎn)量高:產(chǎn)量在50L/月以上,;
兼容性好:可與任何類型的細胞培養(yǎng)基兼容,。
基質(zhì)膠塞實驗(plug assay)
實驗步驟
【2】
取3~7周的BALB/c nude小鼠放置在層流凈化屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。
從-20℃冰箱內(nèi)取Ceturegel®基質(zhì)膠放置4℃下 12h,,待其變成液態(tài),。
將小鼠按實驗分對照組、VEGFA組,、肝素鈉組和VEGFA+肝素鈉組,。
對照組裸鼠經(jīng)皮下注射Ceturegel®高濃度基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA與肝素鈉組裸鼠分別經(jīng)皮下注射添加VEGFA (20 μg/L) ,、肝素鈉 (50U/mL)的基質(zhì)膠0.5 mL,,VEGFA+肝素鈉組裸鼠皮下注射物為混勻VEGFA (20μg /L) 和肝素鈉 (50U/mL) 的基質(zhì)膠0.5mL,皮下注射部位為裸小鼠的腹中線附近,。
1周后處死裸鼠取出基質(zhì)膠塞,,嚴格根據(jù)Drabkin試劑進行血紅蛋白濃度測定。
注:Drabkin試劑配制: 碳酸氫鈉1.0g,,氫化鉀0.05g,,高鐵0.2g,加蒸餾水至1 000ml即可,,置4C冰箱保存,。
實驗結果
圖.BALB/c nude培養(yǎng)7天培養(yǎng)栓塞結果
FAQ
實驗操作要注意哪些事項?
1,、高濃度基質(zhì)膠極易凝固,,接種前基質(zhì)膠及注射針管冰上預冷!
2,、裸鼠皮下注射膠體積較大,,進針深度要把握好,慎防漏液,!
3,、正常飼喂,注意觀察注射基質(zhì)膠部位,穩(wěn)定1-2周觀察即可,!
產(chǎn)品選擇
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
基本濃度 | Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠 | 40183ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40184ES08/10 | 5/10 mL | |
低生長因子 | Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40185ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix GFR,, Phenol Red-Free,,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40186ES08/10 | 5/10 mL | |
高濃度 | Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40187ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration,,Phenol Red-Free,,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40188ES08/10 | 5/10 mL | |
Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40189ES08/10 | 5/10 mL | |
干細胞專用 | Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40190ES08/10 | 5/10 mL |
類器官專用 | Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,,LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40191ES08/10 | 5/10 mL |
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