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急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見的急腹癥，病因復雜,，病死率達5%~10%,，重癥AP死亡率高達20%~30%，目前發(fā)病機制尚未闡述,，無特殊治療方式,。目前活體AP動物模型制作常用方法大致有胰管結扎法、十二指腸閉袢法,、胰膽管穿刺注射法,、胰腺被膜下注射法,、胰膽管注射法結合靜脈輸注法、蛙皮素聯用脂多糖腹腔內注射法等,。
?；悄懰徕c（Taurocholic acid Sodium Salt）容易通過逆行灌注胰腺，模擬膽汁反流,，損傷胰腺,，誘導重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）,。通過激活NF-κB途徑,，引起肺損傷。逆行胰膽管灌注牛黃膽酸鈉是一種經典的重癥急性胰腺炎的造模途徑,。
圖1 ?；悄懰徕c分子結構(CAS .145-42-6）
牛黃膽酸鈉誘導胰腺炎建模步驟（僅供參考）
動物：
牛磺膽酸鈉可以誘導大多數動物發(fā)生AP,，但是此類模型主要應用于嚙齒類動物（如大鼠和小鼠）,。
給藥方式：
牛磺膽酸鈉可誘導急性壞死胰腺炎,，這種模型多伴有多器官功能衰竭,，適用于研究AP的局部和全身并發(fā)癥，用于臨床膽汁反流性胰腺炎的發(fā)病機制及藥物治療療效的研究,，可為研究SAP的靶向治療提供工具,。
1、將動物禁食過夜,，并自由飲用新鮮自來水,。通過腹腔注射10%氯醛脲（0.3mL/100g）進行麻醉。
2,、動物麻醉后,，經腸壁穿刺逆行胰膽管注射，正中切口開腹,，輕拉出十二指腸,，順膽胰管尋找十二指腸開口，使用穿刺針在近十二指腸開口端逆行刺入胰膽管,，用動脈夾夾住膽管入肝處,。
3、以0.1mL/min速度向胰管內勻速注射5%?；悄懰徕c溶液（按0.1mL/100g劑量）,，對照組使用等量生理鹽水替代牛磺膽酸鈉,，注射完畢后留針8-10min,，肉眼觀察胰腺顏色變暗紅,，拔出穿刺針，松開血管夾,，并縫合穿刺的十二指腸壁以免腸液漏至腹腔,，確認腹腔無活動性出血后層層縫皮即可。
模型判定指標：
注射后3,、6,、12、24h檢測血清淀粉酶水平,、胰腺組織的濕/干質量比率及病理組織學評分,，觀察24h生存指數
模型優(yōu)點：
病因、致病機制及病變與臨床急性出血壞死型胰腺炎(AHNP)相似,，成功率高,，重復性好，可比性高,。但對操作者的技術熟練度要求較高,。
實驗案例
圖2 12小時時胰腺的形態(tài)學變化和每個時間點的胰腺組織學評分（引用自：dx.doi.org/10.1155/2015/685043）
實驗采用雄性SPF Wistar大鼠，體重200~250g,，穿刺逆行胰膽管注射5%?；悄懰徕c溶液誘導SAP，在不同時間點進行胰腺H&E病理切片染色,，對胰腺病理進行評分,。
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分類 | 產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
胰腺炎建模試劑 | Caerulein 雨蛙素 | 60321ES03 | 1 mg |
Taurocholic acid Sodium Salt牛磺膽酸鈉 | 60398ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
L-Arginine L-精氨酸 | 61302ES60/76 | 100/500 g | |
其他試劑 | Sodium Cloride 氯化鈉 | 60372ES76/96 | 500g/25kg |
DMSO 二甲基亞砜（細胞培養(yǎng)級） | 60313ES60 | 100 mL | |
Hematoxylin and Eosin Staining Kit 蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒 | 60524ES60 | 2×100 mL |
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