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急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見的急腹癥,，病因復(fù)雜,，病死率達(dá)5%~10%,，重癥AP死亡率高達(dá)20%~30%，目前發(fā)病機(jī)制尚未闡述,，無特殊治療方式,。目前活體AP動物模型制作常用方法大致有胰管結(jié)扎法,、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法,、胰腺被膜下注射法,、胰膽管注射法結(jié)合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內(nèi)注射法等,。
生理?xiàng)l件下,，胰腺大量攝取氨基酸以合成胰酶,，但高濃度氨基酸聚集會破壞胰腺外分泌腺,，誘發(fā)AP。L-Arg（L-精氨酸）是應(yīng)用較為廣泛的用于誘導(dǎo)AP動物模型的堿性氨基酸。
圖1 L-精氨酸分子結(jié)構(gòu)(CAS NO.74-79-3）
牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)胰腺炎建模步驟（僅供參考）
動物：
L-精氨酸可以誘導(dǎo)大多數(shù)動物發(fā)生AP,，但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動物（如大鼠和小鼠）,。
溶液配置：
用0.85%鹽水制備L-精氨酸溶液，并過濾以使其無菌,。
造模方法：
L-Arg誘導(dǎo)AP動物模型,，通常劑量為250-500mg/100g。L-Arg的作用呈劑量和時間依賴性,，單次注射L-Arg 500mg/100g,，70-80%胰腺腺泡細(xì)胞在3d內(nèi)壞死，3次注射L-Arg 250mg/100g超過10d,，近90%的腺泡被破壞,。
1、大鼠：腹腔內(nèi)給藥1g/kg,，1次,；
2、小鼠：腹腔注射3×3或4×2.5 g/kg，10%,，每次間隔1h,。
模型判定指標(biāo)：
注射后3、6,、12h檢測血清淀粉酶水平,、胰腺組織的濕/干質(zhì)量比率及病理組織學(xué)評分，觀察24h生存指數(shù)
表1 胰腺的組織學(xué)評估
水腫 | 0 | 無水腫 |
1 | 小葉間水腫 | |
2 | 小葉間和中度小葉內(nèi)水腫 | |
3 | 小葉間水腫和嚴(yán)重的小葉內(nèi)水腫 | |
白細(xì)胞浸潤 | 0 | 無 |
1 | 稀少的血管周圍浸潤 | |
2 | 中度血管周圍和稀少的彌漫性浸潤 | |
3 | 大量彌漫性浸潤 | |
壞死 | 0 | 無壞死 |
1 | 少于15%的胰腺細(xì)胞 | |
2 | 15-35%的細(xì)胞參與 | |
3 | 超過35%的細(xì)胞參與 |
模型優(yōu)點(diǎn)：
操作簡便,，價廉,，對機(jī)體損傷小，死亡率低,，有良好的時間和劑量依賴性,，所致胰腺炎與人胰腺炎相似，病變均勻,。但個體差異大,，病理機(jī)制與臨床相關(guān)性差。
實(shí)驗(yàn)案例
圖2 L-精氨酸誘導(dǎo)胰腺炎造模結(jié)果（引用自doi.org/10.3390/nu14132591）
實(shí)驗(yàn)采用C57BL/6小鼠（雄性,，8周齡,，體重22-25克），腹腔注射L-精氨酸溶液誘導(dǎo)胰腺炎（3.0 g/kg, q1 h, 3 h）,，檢測淀粉酶水平（b）,、血清中脂肪酶（c）和LDH（d）、（e）胰腺組織中IL-1β的水平,、（f）觀察胰腺的大體形態(tài)以及（gi）L-精氨酸急性胰腺炎胰腺的代表性H&E圖像,。
相關(guān)產(chǎn)品
分類 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
胰腺炎建模試劑 | Caerulein 雨蛙素 | 60321ES03 | 1 mg |
Taurocholic acid Sodium Salt牛磺膽酸鈉 | 60398ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
L-Arginine L-精氨酸 | 61302ES60/76 | 100/500 g | |
其他試劑 | Sodium Cloride 氯化鈉 | 60372ES76/96 | 500g/25kg |
DMSO 二甲基亞砜（細(xì)胞培養(yǎng)級） | 60313ES60 | 100 mL | |
Hematoxylin and Eosin Staining Kit 蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒 | 60524ES60 | 2×100 mL |
相關(guān)專題
1. 雨蛙素誘發(fā)的急性胰腺炎動物模型
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