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使用POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm色譜柱,，參照《中國(guó)藥典》高效液相色譜法對(duì)決明子提取物進(jìn)行含量測(cè)定，檢測(cè)大黃酚,、橙黃決明素,，可滿足實(shí)驗(yàn)要求。

對(duì)照品溶液的制備取大黃酚對(duì)照品,、橙黃決明素對(duì)照品適量,，精密稱定，加無(wú)水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液制成每1ml含大黃酚30μg,、橙黃決明素20μg的混合溶液,，即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.5g,，精密稱定,，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml,，稱定重量,，加熱回流2小時(shí)，放冷,，再稱定重量,，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻,，濾過(guò),，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干,，加稀/鹽酸30ml,，置水浴中加熱水解1小時(shí),，立即冷卻,，用三氯jia烷振搖提取4次，每次30ml,，合并三氯jia烷液,，回收溶劑至干，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液使溶解,，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,，并稀釋至刻度，搖勻,，濾過(guò),，取續(xù)濾液,，即得。

測(cè)定法  分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl,，注入液相色譜儀,，測(cè)定，即得,。

色譜條件

色譜柱：POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm

流動(dòng)相：A 乙腈   B 0.1%磷酸溶液

             B conc. 60%（0-15min）

                60→10%（15-30min）

                 0%（30-40min）

流 速：1 mL/min

柱 溫：25 ℃

波 長(zhǎng)：UV 284nm

進(jìn)樣量：10μL

理論板數(shù)按橙黃決明素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000,。