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上海橋星生物
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PBS
NaCl 8 g
KCl 0.2 g
KH2PO4 0.2 g
Na2HPO4·12H2O 3.634g
加dH2O至900ml,調(diào)pH至7.4,,補水至1L,,分裝到5個藍(lán)蓋瓶,滅菌,。
TP+EDTA混合液
稱取TP 0.25g,,EDTA 0.02g,溶于200ml PBS中,,過濾除菌,。
DMEM與RPMI 1640
前者稱取NaHCO3 3.7g,后者稱取2.0g,。
調(diào)pH至7.2~7.4,。
谷氨酰胺的配制
稱取Gln 2.922g,,溶于三蒸水,加至100ml,,即配成200 mM的儲液,。充分?jǐn)嚢枞芙猓^濾除菌,,分裝到2ml EP管中,,-20℃保存,。使用時可向100ml培養(yǎng)液中加入1ml Gln儲液,。
由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,4℃下放置1周可分解50%,,加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2周以上時,,應(yīng)重新加入原來的谷氨酰胺。
G418儲液(0.1 mg / uL)
100ml 培養(yǎng)基中加入儲液400uL,,則篩選濃度為400 ug/ml,。
100ml培養(yǎng)基中加入儲液200 uL,則維持濃度為200 ug/ml,。
LB液體培養(yǎng)基
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 10g
dH2O 1L
用5M的NaOH約0.2 ml調(diào)pH至7.0,。滅菌20min。
LB固體培養(yǎng)基,,另加瓊脂12~15g,。
LB中氨芐的添加
稱取5g氨芐,加水定容至50ml,,充分溶解,,得到的儲液濃度為100mg/ml。過濾除菌,,分裝到EP管中,,-20℃保存。
欲使其工作濃度為100ug/ml,,則需稀釋1000倍,。
即加1ml到1000ml培養(yǎng)基中?;蚣?00ul到100ml培養(yǎng)基中,。
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