嘔吐毒素其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌侏,,其主要污染玉米,、小麥、大米,、大麥,、小米和燕麥等谷物,目前,,嘔吐毒素的酶聯(lián)免疫法,,免疫膠體金法等檢測(cè)方法均需要嘔吐毒素抗原抗體。
(1)嘔吐毒素半抗原合成(合成技術(shù)路線見(jiàn)下圖)
20-100mg嘔吐毒素,與1-3mol馬來(lái)酸酐,,在2-5ml甲苯中,,于80℃攪拌反應(yīng),8-20h后,,蒸干溶劑,,酸化,萃取,,重結(jié)晶后得到嘔吐毒素半抗原,。
(2)嘔吐毒素全抗原(人工抗原、*抗原,、酶標(biāo)抗原)合成
將嘔吐毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫原,。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg嘔吐毒素半抗原,,室溫?cái)嚢?h,再加6mg EDC,,暗處攪拌反應(yīng)并過(guò)一晚上,用0.01mol/LPBS透析3天,,每天換3次透析液,,得到嘔吐毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。
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