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一,、實(shí)驗(yàn)背景
結(jié)膜為一層富有血管的薄而透明的粘膜,,覆蓋于眼瞼的內(nèi)面和眼球的前面。按其所在部位分為瞼結(jié)膜,,球結(jié)膜和結(jié)膜穹窿,。結(jié)膜有助于防止異物和感染對(duì)眼球的損害,但結(jié)膜本身也會(huì)受到化學(xué)物質(zhì)或過敏物質(zhì)的刺激,,或受到病毒,、細(xì)菌的感染,出現(xiàn)眼痛,、眼癢及充血,。由于眼結(jié)膜*的韌性,類似于纖維,,手動(dòng)研磨通常難以研磨充分,;為了提高科研工作者的實(shí)驗(yàn)效率和研究進(jìn)度,本方法采用上海凈信多樣品組織研磨儀,,對(duì)樣品進(jìn)行研磨處理,,以便于實(shí)驗(yàn)人員可以更好進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),如充分提取RNA,、蛋白等,。
二、研磨方法
1,、實(shí)驗(yàn)步驟:
a,,準(zhǔn)備好待研磨的眼結(jié)膜100毫克,干凈并滅菌的2ml鋼罐一套及研磨珠若干,液氮一升,;
b,,將樣品置于2ml鋼罐中,將其整個(gè)浸入液氮中5mins,,然后安裝到上海凈信多樣品組織研磨儀上,;
c,設(shè)置研磨參數(shù):頻率為60hz,,時(shí)間45s,,啟動(dòng)設(shè)備進(jìn)行研磨;
d,,待設(shè)備停止運(yùn)行,,取出研磨鋼罐。
e,打開鋼罐往里加1ml提取液手動(dòng)混勻,。再將樣品轉(zhuǎn)移至2ml離心管內(nèi),,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。
樣品處理結(jié)果:
樣品研磨前
樣品研磨后
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