會(huì)員.png)
7
當(dāng)前位置：上海天普分析儀器有限公司>>技術(shù)文章>>選擇液相色譜柱要考慮哪些因素？
選擇液相色譜柱要考慮哪些因素,？
色譜柱是運(yùn)用于色譜儀系統(tǒng)中起著分離作用的儀器，是色譜儀分析系統(tǒng)的核心部件,，色譜柱柱效的高低影響著檢測(cè)速率的快慢以及檢測(cè)結(jié)果的性,。因此,，為了提高色譜柱的柱效，液相色譜儀分析檢測(cè)的靈敏性,，了解液相色譜柱的選購(gòu)技巧尤為重要,。
選擇液相色譜柱時(shí)需要考慮的主要因素包括：鍵合相、粒徑,、孔徑,、碳載量，下面來(lái)一一介紹：
1,、鍵合相：確定了正反相后基本就簡(jiǎn)單了,，正相很簡(jiǎn)單，我們重點(diǎn)討論下反相,，C18主要分離非極性和弱極性物質(zhì),，因?yàn)槭擎I合硅膠，所以C18也分好幾種有常規(guī)的如C18-A,，耐純水的OL Apple C18-AQ,、耐酸堿的OL Apple C18-EX等，如果發(fā)現(xiàn)C18保留很弱,，調(diào)整流動(dòng)相也不行,，這個(gè)時(shí)候可以考慮C8甚至C4等。
2,、粒徑：色譜法追求的是,、高分辨、高速等,。目前來(lái)說(shuō)亞2um填料或者2UM核殼填料是很理想的模型,，基本具備“三高”特征尤其是高速，線速度不在影響分離度,，不過(guò)附帶的缺點(diǎn)就是高壓,，要升級(jí)相應(yīng)的硬件，成本高昂,，需要謹(jǐn)慎考慮,。5um填料普遍，目前來(lái)說(shuō)可以勝任各種日常檢測(cè),，即使有特殊要求,，3um色譜填料基本上也能全覆蓋，不過(guò)該模型下線速度和分離度是成反比的,。
3,、孔徑：目前很多60~300A都有，甚至更高或者更低的,。開(kāi)孔的填料多了個(gè)類(lèi)似分子篩功能,，所以選擇孔徑一定要關(guān)注分子量,，蛋白（分子量5000以上）一般都需要在160A以上，多肽（分子量上限在3000左右）在120A左右,，一般快速柱孔徑都很小,，可以縮短樣品路徑。所以上還有無(wú)孔硅膠柱子,，也很適合蛋白分離,，解決蛋白分子量大和太粘稠堵住孔徑問(wèn)題。
4,、碳載量：快速柱碳載量很低,，如A家等，省時(shí)間,，省溶劑,，但分析部分復(fù)雜樣品如中藥等有點(diǎn)力不從心，這個(gè)時(shí)候可以考慮英國(guó)OL Apple色譜柱,，碳載量15~23%，碳載量數(shù)值就像河床的水草,，越高代表越密集,，保留樣品能力越強(qiáng)，越有可能分離開(kāi)難分離物質(zhì),。