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應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品 |
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山東盛泰儀器霉菌毒素測定儀廠家
ST-2000A霉菌毒素測定儀
ST-2000A霉菌毒素測定儀是當(dāng)前,、酶聯(lián)免疫等分析的一種分析儀器,。采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,即酶聯(lián)免疫法,,由本儀器與B1試劑盒二大件組成,,能*、定量測定樣品中B1的含量(如配其他試劑盒,,可測其他毒素),,廣泛應(yīng)用于糧食、食品,、飼料,、油脂、乳制品、藥物,、飲料,、酒等產(chǎn)品的黃曲霉毒素B1及其他霉菌毒素的檢測。
性能特點(diǎn):
2,、振板功能:3 級振板速度,、時(shí)間 0-255 秒可調(diào)
3、工 作 站:專業(yè)的酶標(biāo)儀軟件,,可存儲 500 組程序,、100000 個(gè) 樣本結(jié)果,提供吸光度,、線性方程,、對數(shù)方程、二次方程,、三次方程,、吸光度百分比-濃度對數(shù)方程、樣條函數(shù),、抑制率等豐富的計(jì)算模式
技術(shù)參數(shù):
光 源:DC12V 22W 進(jìn)口鹵素?zé)?/font>
波長范圍:400-900nm
濾 光 片:標(biāo)配 405,、450、492,、630nm,,其它波長可選配
讀數(shù)范圍:0-4.000Abs
分 辨 率:0.001Abs
示值誤差:≤±0.01Abs
穩(wěn) 定 性:≤±0.003Abs
重 復(fù) 性:≤0.3%
尺寸:400mm(L)*260mm(W)*200mm(H)
山東盛泰儀器霉菌毒素測定儀廠家
1 原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測谷物、飼料等樣品中的黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,,AFB1),,試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物,、抗體,、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時(shí),,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,,樣本中的黃曲霉毒素B1和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗黃曲霉毒素B1抗體,加入酶標(biāo)記物后,,用TMB底物顯色,,樣本吸光度值與其所含黃曲霉毒素B1含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中黃曲霉毒素B1的殘留量,。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.03ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,,30min~15min
2.3 檢測下限:
谷物……………………………………0.15ppb
配合飼料………………………………0.3ppb
食用油,、花生…………………………0.6ppb
醬類、麥類等飼料……………………0.3ppb
啤酒……………………………………0.3ppb
葡萄酒,、醬油,、醋……………………0.15ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:
黃曲霉毒素B1…………………………100%
2.5 樣本回收率:
谷物及配合飼料……………………85%±15%
花生…………………………………82±15%
食用油………………………………85±15%
醬類、麥類等飼料………………83±15%
啤酒………………………………84±15%
葡萄酒,、醬油,、醋………………87±15%
3 試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液(黑蓋):各1ml
0ppb、0.03ppb,、0.06ppb,、0.12ppb、0.24ppb,、0.48ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液:100ppb…………………1ml
酶標(biāo)記物(紅蓋)…………………5.5ml
抗體工作液(藍(lán)蓋)………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20X濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
說明書………………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:
測定儀,、打印機(jī)、均質(zhì)器 ,、氮?dú)獯蹈裳b置,、振蕩器、離心機(jī),、刻度移液管,、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl,、多道300µl
4.3 試劑:甲醇,、正己烷、或二氯甲烷
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:樣品提取液
70%甲醇,,即V甲醇:V去離子水=7:3,。
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 谷物處理方法
1)稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中,加5ml樣品提取液,,振蕩5分鐘,,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
2)取0.5ml上清,,加入0.5ml去離子水,,混勻;
3)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):5 檢測下限:0.15ppb
5.3.2 玉米皮,、麥麩等吸水性強(qiáng)的樣本處理方法
1)稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中,加20ml樣品提取液,,振蕩5分鐘,,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
2)取0.5ml上清,加入0.5ml去離子水,,混勻,;(對于毒素含量*的樣本可用35%的甲醇稀釋后再測。比如取2)中的混合液0.1ml加35%的甲醇0.9ml混勻,,最終樣本稀釋倍數(shù)為200,,檢測下限為6ppb。)
3)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):20 檢測下限:0.6ppb
注:由于毒素在樣本中的分布呈非均勻狀態(tài),,取樣時(shí)需多點(diǎn)取樣充分混勻后再取2g進(jìn)行試驗(yàn)。
5.3.3 配合飼料處理方法
1)稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中,,加10ml樣品提取液,,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,;
2)取0.5ml上清,,加入0.5ml去離子水,混勻,;
3)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):10 檢測下限:0.3ppb
5.3.4 食用油、花生,、高油脂的飼料處理方法
1)稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中,,加8ml正己烷和10ml樣品提取液,振蕩5分鐘,,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,;
2)去除上層液體,取0.5ml下層液體加入0.5ml去離子水,,混勻,,再取混勻液體0.5ml加入0.5ml 35%甲醇,振蕩30S,;
3)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):20 檢測下限:0.6ppb
5.3.5 醬類、麥類,、餅干,、糕點(diǎn)等食品或調(diào)料,以及飼料濃縮料等飼料處理方法
1)稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中,,加10ml樣品提取液,,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,;
2)取2ml上清,,加入4ml(或二氯甲烷),,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,;
3)轉(zhuǎn)移上層液體到另一容器中,,下層液留置備用,向上層液中再加入4ml(或二氯甲烷),,充分振蕩混5分鐘,,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
4)去除上層液體,,合并兩次的下層液體并充分混勻,;
5)取合并后的下層液體2ml于50-60℃氮?dú)庀麓蹈桑?/span>
6)加入0.5ml樣品提取液充分溶解干燥物,再加入0.5ml去離子水混勻,;
7)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):10 檢測下限:0.3ppb
5.3.6 啤酒處理方法
1)將啤酒充分?jǐn)嚢瑁ㄈコ鼵O2),取2ml啤酒樣品,,加入1ml蒸餾水,,再加入7ml甲醇,振蕩5分鐘,;
2)取混勻后的樣品液0.5ml加入0.5ml去離子水,,混勻;
3)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):10 檢測下限:0.3ppb
5.3.7 葡萄酒,、醬油、醋處理方法
1)取2ml樣品,,加入2ml蒸餾水,,再加入10ml(或二氯甲烷),振蕩5分鐘,,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,;
2)取下層液體1ml于50-60℃氮?dú)庀麓蹈桑?/span>
3)加入0.5ml樣品提取液充分溶解干燥物,再加入0.5ml去離子水,,混勻;
5)取50μl進(jìn)行分析,。
樣本稀釋倍數(shù):5 檢測下限:0.15ppb
6 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻,。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃,。
實(shí)驗(yàn)開始前,,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液,。
6.1 編 號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置,。
6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,,再加入50µl/孔的抗體工作液,,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,,25℃反應(yīng)30分鐘,。
6.3 洗 滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破),。
6.4 顯 色:每孔加入底物液A 50µl,,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,,25℃避光顯色15分鐘,。
6.5 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,,終止反應(yīng),。
6.6 測吸光值:用測定儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成
6.7 ST-2000A自動(dòng)測定儀自動(dòng)完成測定,,自動(dòng)出結(jié)果,。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)