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PCR原理

　　DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,，在DNA聚合酶的參與下,，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝,。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈,。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,，加入設(shè)計(jì)引物,，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制,。
　　但是,，DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活，因此,，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,，不僅操作煩瑣，而且價(jià)格昂貴,，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展,。
　　發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,，不需要每個(gè)循環(huán)加酶,，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,，PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用,，并逐步應(yīng)用于臨床。
　　PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物,。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,，使之成為單鏈,，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備,；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合,；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板,，按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理,，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板,。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘,，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

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  其他相關(guān)試劑:                                                                                                           /Sodium 偶氮苯/二苯基二氮烯/苯偶氮苯/二苯二亞胺/二苯二胺/Azobenzene AR,，99% 103-33-3 RT
4-溴氯苯/對(duì)溴氯苯/對(duì)氯溴苯/4-氯-1-溴苯/1-溴-4-氯苯/1-氯-4-溴苯/4-BromoSFhlorobenzene SFSF 106-39-8 RT
4-溴聯(lián)苯/對(duì)溴聯(lián)苯/4-溴-1,1'-聯(lián)苯/4-溴代聯(lián)苯/4-溴雙苯/4-BromobiSFhenyl BR,，99% 92-66-0 RT
暈苯/六苯并苯/冠/蔻/SForonene 特純，95% 191-07-1 RT
1,3-二溴苯/間二溴苯/1,3-Dibromobenzene BR,，96% 108-36-1 RT
2,2-二羥基聯(lián)苯/2,2'-二羥基聯(lián)苯基/2,2ˊ-聯(lián)苯酚/鄰,鄰ˊ-聯(lián)苯酚/2,2'-聯(lián)苯二酚/雙苯醇/2,2'-BiSFhenol BR,，99% 1806-29-7 RT
1,4-二甲氧基苯/對(duì)二甲氧基苯/對(duì)苯二酚二甲醚/氫醌二甲醚/氫醌二甲基醚/二甲基對(duì)苯二酚/對(duì)苯二甲醚/對(duì)甲氧基苯/二甲氧基苯烯/DMB SFSF，99% 150-78-7 RT
聯(lián)苯/苯基苯/聯(lián)二苯/1,1’-聯(lián)苯/BiSFhenyl SFSF 92-52-4 RT
 色標(biāo)  
碘代苯/碘苯/Iodobenzene SFSF,，97% 591-50-4 RT,，避光
4-甲氧基偶氮苯/對(duì)苯偶氮苯甲醚/對(duì)甲氧基偶氮苯/4-Methoxyazobenzene BR，97% 2396-60-3 RT
1,3,5-三溴苯/均三溴苯/1,3,5,-三溴代苯/對(duì)稱三溴苯/1,3,5-Tribromobenzene BR,，98% 626-39-1 RT,，避光
2,3-二氨基萘/2,3-萘二胺/DAN BR，97% 771-97-1 RT,，避光
2,2-二羥基二硫代-6,6-聯(lián)萘/雙（6-羥基-2-萘）二硫/1,，1-二氯-2，2-雙（4-）乙烷/2,2ˊ-二羥基-6,6ˊ-二萘二硫/6,6'-二硫-2,2'-二萘酚/DDD BR,，95% 6088-51-3 RT，避光
1,4-二羥基萘/1,4-萘二酚/1,，4-二氧萘酚/1,4-DihydroxynaSFhthalene BR,，90% 571-60-8 RT，避光
1,5-二羥基萘/1,5-萘二酚/萘-1,5-二酚/1,5-DihydroxynaSFhthalene BR,，97% 83-56-7 RT,，避光
硫酸鋅/皓礬/七水硫酸鋅/鋅礬/ZinSF sulfate heSFtahydrate AR，99.5% 7446-20-0 RT
 4N  
氧化鋅/鋅氧粉/鋅華/白鉛粉/鋅白/環(huán)氧乙酰蓖麻油酸甲酯/中國(guó)白/鋅白銀/ZinSF Oxide AR,，99% 1314-13-2 RT
 4N  
 基準(zhǔn)試劑  
溴化鋅/無(wú)水溴化鋅/ZinSF bromide SFSF,，98% 7699-45-8 RT，避光
堿式碳酸鋅/碳酸鋅氫氧化物/碳酸鋅單水合物/ZinSF SFarbonate basiSF SFSF,，70% SFAS:5263-02-5 RT
氫氧化鋅/ZinSF hydroxide SFSF,，98% 20427-58-1 RT
磷酸鋅/四水磷酸鋅/ZinSF SFhosSFhate tetrahydrate SFSF，99% 7543-51-3 RT
磷酸二氫鋅/ZinSF SFhosSFhate monobasiSF SFSF,，19-25% 13598-37-3 RT
乙酸鋅/醋酸鋅/二水合醋酸鋅/ZinSF aSFetate dihydrate AR,，99% 5970-45-6 RT
硬脂酸鋅/硬酯酸鋅/十八酸鋅/脂蠟酸鋅/十八酸鋅鹽/硬脂酸鋅鹽/SteariSF aSFid zinSF salt SFSF，13.5-15.5% 557-05-1 RT
硫化鋅/閃鋅礦/ZinSF sulfide 熒光純,，95% 1314-98-3 RT,，避光
 電子真空涂漠  
植酸/肌醇六磷酸/環(huán)己六醇磷酸酯/肌醇六磷酸酯/環(huán)已六醇六磷酸酯/SFhytiSF aSFid BR,，70% 83-86-3 RT
乙醛酸/甲醛甲酸/二羥醋酸/氧代乙酸/GlyoxyliSF aSFid BR，98% 298-12-4 RT
 BR,，50%水溶液  
乙醛酸一水物/甲醛甲酸/二羥醋酸/二羥基乙酸/GlyoxyliSF aSFid monohydrate BR,，98%  
L-酒石酸/左旋葡萄酸/二羥基琥珀酸/天然酒石酸/L-2,3-二羥基丁二酸/左旋酒石酸/L（+）-酒石酸/L（+）-2,3-二羥基丁二酸/2,3-二羥基丁二酸/葡萄酸/左旋-2,3-二羥基琥珀酸/L（+）-TartariSF aSFid GR，99.5% 87-69-4 RT
DL-酒石酸/葡萄酸/消旋酒石酸/二羥基丁二酸/外消旋酒石酸/二羥基琥珀酸/酒石酸/（R*,R*）-（±）-2,3-二羥基丁二酸/DL-2,3-二羥基丁二酸/DL-（-）-酒石酸/（2R,3R）-2,3-二羥基, 1,4丁二酸/DL-TartariSF aSFid AR,，99% 133-37-9 RT
D-酒石酸/右旋酒石酸/2,3-二羥基丁二酸/葡萄酸/二羥基琥珀酸/D-2,3-二羥基琥珀酸/D-2,3-二羥基丁二酸/[S-（R*,R*）]-2,3-二羥基丁二酸/D順-15-二十四碳單烯酸/神經(jīng)酸/順-15-二十四碳烯酸/鯊油酸/二十四烯酸/鯊魚(yú)酸/NervoniSF aSFid BR,，99% 506-37-6 保存：-20℃
草酸/二水合乙二酸/蓚酸/OxaliSF aSFid dihydrate GR，99.8% 6153-56-6 RT
 AR,，99.5%  
 基準(zhǔn)試劑  
丹寧酸/鞣酸/單寧酸/炭尼酸/沒(méi)食子鞣酸/鞣質(zhì)/沒(méi)食子鞣酸/柔酸/單寧/二倍酸/落葉松栲膠/楓香木/TanniSF aSFid AR 1401-55-4 RT,，避光
鉬酸/MolybdiSF aSFid GR，99% 7782-91-4 RT
硅酸/含水二氧化硅/矽酸/ SiliSFiSF aSFid AR 1343-98-2 RT
硅鎢酸/鎢硅酸/硅鎢酸水合物/SiliSFotungstiSF aSFid hydrate AR 12027-43-9 RT
鎢酸/（T-4）-二氫合鎢酸/鎢（VI）酸/TungstiSF aSFid GR SFAS:7783-03-1 RT
 AR  
乙炔-1,2-二羧酸/丁炔二酸/乙炔二羧酸/2-丁炔二酸/2-ButynedioiSF aSFid BR,，97% 142-45-0 RT
α-溴異丁酸/2-溴-2-甲基丙酸/2-溴異丁酸/α-溴代異丁酸/2-溴代異丁酸/α-BromoisobutyriSF aSFid BR,，98% SFAS:2052-01-9 RT，避光
大黃根酸/大黃酚/驅(qū)蟲(chóng)豆酸/3-甲基-1,8-二羥基蒽醌/1,8-二羥基-3-甲基蒽醌/大黃根酚/3-甲金黃異茜素/SFhrysoSFhaniSF aSFid BR,，98% 481-74-3 RT,，避光