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ELISA試劑盒組成及試劑配制

閱讀:246      發(fā)布時(shí)間:2013-9-26
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ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,,蓋好后靜置10分鐘以上,,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,,將其稀釋為400 pg/ml后,,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,,100 pg/ml,,50 pg/ml,25 pg/ml,,12.5 pg/ml,,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,,臨用前15分鐘內(nèi)配制,。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
3. 樣品稀釋液:1×20ml。
4.檢測(cè)稀釋液A:1×10ml,。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml,。
6.檢測(cè)溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml,。如10μl檢測(cè)溶液A加990μl檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制,。
7.檢測(cè)溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A,。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶,。
9.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10.終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
11.覆膜:5張

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