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我國學(xué)者共同合成并篩查了一種對惡性腫瘤再生細(xì)胞增生和轉(zhuǎn)移具有特別療效的新型靶向分子藥物,可100%殺死乳癌,、肺癌等再生細(xì)胞,,未來有可能從根本上提高癌癥的*。近日,,雜志《自然·通訊》介紹了這項(xiàng)醫(yī)學(xué)研究成果,。P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞,,上海乾思生物公司細(xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,,在中國大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁,。為您提供P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞外,還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,,標(biāo)準(zhǔn)品,,細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。
1. P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,?還是冷凍好,?
要冷藏!,!因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí),,其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變,溶液往往變堿,,某些成分溶解也會(huì)受到影響對細(xì)胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年,。
2.P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,,及使用方法。
幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),,在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長不良而死亡,。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色,,-24?C保存。
3. P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞 培養(yǎng)用液pH對細(xì)胞生長的影響
由于,,大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響,。各種細(xì)胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動(dòng)耐受差,,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng),。
但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長,。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時(shí),,可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些,。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shí),溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右,。
4.P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞 細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶濃度越高越好嗎,?
不見得!因?yàn)橐鹊鞍酌溉芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H,、溫度,、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng),。另外,鈣,、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力,。我們每次進(jìn)行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,,這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為:
?。?)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA,;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA,。
?。?)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制,。
多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA這種消化液,。
購買上海乾思生物細(xì)胞注意事項(xiàng)(乾思生物)發(fā)布
一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,,200X各一張),,排除細(xì)胞本身污染的情況;
收到細(xì)胞未開封,,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞,。
二、如為貼壁細(xì)胞,,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度:
1. 未超過80%匯合度時(shí),,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作,;然后打開蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。
2. 超過80%匯合度時(shí),,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,,細(xì)胞隨即脫落下來,;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶。
三,、如為懸浮細(xì)胞,,吸出培養(yǎng)液,,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,,吸出上清,,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶,。
注意:換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好,。
四,、細(xì)胞出現(xiàn)問題,,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么,?
?。?)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,,細(xì)胞丟失,、破損,、漏液等,重發(fā),;
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,,重發(fā),;
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā),;
?。?)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,,重發(fā),;
(5)視具體情況而定,。
五,、細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些,?
?。?)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā),;
?。?)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
?。?)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,,不重發(fā),;
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,,不重發(fā),;
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),,未告知,,不重發(fā);
?。?)視具體情況而定,。
六、售后服務(wù)政策
Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌,;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,,超低比價(jià),,另常備 Trizol DMSO lipo2000 lipo3000 SC-2004 SC-2005常備現(xiàn)貨 ,;貨期短,價(jià)格優(yōu),,售后齊全。
細(xì)胞污染問題,,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),,給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果;細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,我們調(diào)查核實(shí)后予免費(fèi)調(diào)換,不收取任何費(fèi)用。
需要客戶提供P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)說明,、細(xì)胞操作處理方法,、細(xì)胞質(zhì)量問題反饋表,。
如用戶收到細(xì)胞8-30天之內(nèi),,因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染,,我公司將優(yōu)惠價(jià)重新提供一株原細(xì)胞
P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞質(zhì)量可靠,,售后有保障
★我?guī)旒?xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制。
凍存細(xì)胞時(shí)間為5-7個(gè)工作日,,活細(xì)胞為7-15個(gè)工作日,。
★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多,為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤,,需要了解P19-CAG-tTA-1F3細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料請老師,,對您造成的不便還請見諒!
(編輯:tanxi)
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